L Wnt-3A小鼠皮下结缔组织细胞 新品

产品信息：

种属:小鼠

生长特性:贴壁细胞

细胞形态:成纤维细胞样

冻存条件:冻存液： 通用血清型程序冻存液

温度：液氮

培养方案A（默认）:生长培养基：DMEM+0.4 mg/mL G-418 +10% FBS +1% P/S

培养条件：气相：空气，95%；CO₂，5%, 温度：37℃

推荐传代比例:1:3-1:8

推荐换液频率:2-3次/周

参考资料(来源文献)

背景描述:L Wnt-3A细胞是由L-M(TK-)细胞用Wnt-3A表达载体转染并在含G418的培养基中筛选出的稳转株。Wnt-3A基因编码一个有变异的信号功效分泌性糖蛋白，Wnt基因控制胚胎发过程中的许多模式形成和生长事件。L Wnt-3A细胞分泌有生物活性的Wnt-3A蛋白，L Wnt-3A细胞是目前生产Wnt-3A条件培养基的好来源。由于这种条件培养基还包含Wnt-3A蛋白外的其他因子，对于涉及Wnt-3A条件培养基的实验有必要用其来源细胞株作对照。

年龄（性别）:100D;Male

组织来源:组织：皮下结缔组织；疏松结缔组织及脂肪；品系：C3H/An

细胞类型:自发永生化细胞

生物安全等级:BSL-1

基因表达情况:Wnt-3A

保藏机构:ATCC; CRL-2647

培养条件

培养基配方：DMEM高糖培养基（90%）+ 10%胎牛血清 + 0.4 mg/ml G418（部分配方含1% P/S）。

培养环境：37℃、5% CO?、饱和湿度（95%空气）。

换液频率：每2-3天更换一次培养基。

传代操作

消化方法：

使用0.25%胰蛋白酶-0.53 mM EDTA溶液（1-3 ml/T25瓶），37℃消化1-3分钟。

显微镜下观察细胞间隙增大、细胞变圆时，加入完全培养基终止消化。

传代比例：1:2至1:5（常规1:3-1:4），接种后24-48小时贴壁完全。

关键步骤：

弃上清，PBS润洗1-2次；消化后轻柔吹打制成单细胞悬液；离心（1000 rpm，3-5分钟）去除胰酶。

冻存与复苏

冻存液：90%完全培养基 + 10% DMSO（现配现用）。

冻存程序：细胞密度4-6×10?/ml，分装至冻存管（1-1.5 ml/管）；程序降温（-80℃过夜后转入液氮）。

复苏方法：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液，重悬于新鲜培养基后接种。

生长特性与注意事项

形态特征：成纤维细胞样，贴壁生长。

应用与来源

核心用途：分泌Wnt-3A蛋白，用于胚胎发育、信号通路研究及条件培养基制备。

细胞来源：小鼠C3H/An品系皮下结缔组织（雄性，100日龄）。

保藏机构：ATCC（CRL-2647）、ECACC等。

公司正在出售的产品：