bEnd.3小鼠脑微血管内皮细胞株

产品信息：

种属:小鼠

生长特性:贴壁细胞

细胞形态:上皮细胞样

冻存条件:冻存液： 通用血清型程序冻存液

温度：液氮

培养方案A（默认）:生长培养基：DMEM+10% FBS +1% P/S

培养条件：气相：空气，95%；CO?，5%, 温度：37℃

推荐传代比例:1:2-1:4

推荐换液频率:2-3次/周

注意事项:

1.该细胞在低密度下形态不规则，细胞数量少，铺展面积大，高密度后形态会趋于一致，胞体密集。

2.细胞增殖偏慢，初次传代建议1:2，细胞稳定后建议传代比例也不超过1:4。

3.注意观察培养基颜色，颜色偏紫会导致细胞漂浮增加。

4.消化时间会随着细胞生长时间和细胞密度而有所不同，需要结合消化时细胞状态来判断，消化到细胞可以滑落方可终止。

参考资料(来源文献)

背景描述:小鼠脑血管内皮瘤细胞bEnd.3 [BEND3]从内皮瘤小鼠的脑组织中分离获得，经编码多瘤病毒中间T抗原的逆转录病毒转化而永生化。该细胞具有表达血管性血友病因子、可摄入低密度脂蛋白（LDL）等内皮细胞特性。该细胞种持续表达细胞粘附分子1（ICAM-1），并在LPS、IL-1和TNF-a处理后升高。代数较早的bEnd.3细胞未受刺激时在表面表达MAdCAM-1，但30代后就不表达了。类似地，30代前细胞持续表达血管细胞粘附分子1（VCAM-1），但30代后也不表达。肿瘤坏死因子（TNF alpha）可以诱导bEnd.3细胞表达P-选择素的，且在30代后表达更强。bEnd.3可用于神经科学研究。

年龄（性别）:6W;Sex unspecified

组织来源:大脑皮层

细胞类型:转化细胞系

生物安全等级:BSL-1

抗原表达情况:ICAM-1 +; VCAM-1 +; MAdCAM-1 +

基因表达情况:von Willebrand factor,ICAM-1 +; VCAM-1 +; MAdCAM-1 +,The endothelial nature of these cells was confirmed by the observed expression of von Willebrand factor and uptake of fluorescently labeled low density lipoprotein (LDL). The expression of Peyer's Patch high endothelial receptor for lymphocytes, the mucosal vascular addressin (MAdCAM-1) and E-selectin can be induced on bEnd3.

保藏机构:ATCC; CRL-2299 BCRC; 60515 ECACC; 96091929

bEnd.3小鼠脑微血管内皮细胞是一种来源于患有内皮瘤的BALB/c小鼠脑组织的永生化细胞系，通过表达多瘤病毒中间T抗原的NTKmT逆转录病毒载体感染原代细胞实现永生化。

该细胞系具有典型的内皮细胞特性，如表达血管性血友病因子（vWF）、摄取荧光标记的低密度脂蛋白（LDL），并可诱导表达细胞粘附分子（如ICAM-1、VCAM-1、P-selectin）等，

广泛应用于血脑屏障研究、神经科学（如神经元迁移、阿尔兹海默症）、血管新生及炎症反应等领域。

培养操作要点

培养体系与条件：

基础培养基为DMEM（含高糖），添加10%胎牛血清（FBS）、1%双抗（青链霉素），培养条件为37℃、5% CO?、95%空气，湿度70%-80%。

注意：培养基pH敏感，建议使用含1.5 g/L碳酸氢钠的DMEM，并避免频繁换液（每2-3天换液一次）。

冻存与复苏：

冻存液配方：90% FBS + 10% DMSO（或基础培养基+10% DMSO+20% FBS），密度≥1×10?个/mL，程序降温后液氮保存。

复苏：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液，重悬于完全培养基后接种，培养箱静置2-4小时后换液。

细胞特点与常见问题

形态与生长特性：

贴壁生长，形态多样：低密度时呈不规则或梭形，高密度时（≥80%）呈规则纤维状或“鹅卵石”样单层排列。

增殖偏慢，倍增时间约26-30小时，培养过程中可能出现10%活漂浮细胞及碎片，属正常现象，建议保留漂浮细胞。

常见问题处理：

形态异常：多因密度过低，建议高密度传代（铺满瓶底）。

消化困难：严格控制消化时间，轻柔吹打，避免机械损伤；培养基颜色偏紫（碱性）时及时换液。

代次影响：细胞超过30代后，部分分子表达（如VCAM-1、MAdCAM-1）下降，建议使用低代次细胞（≤30代）。

应用与注意事项

应用方向：适用于血脑屏障模型构建、神经毒性研究、血管新生实验（如Transwell迁移、管腔形成实验）及药物靶向递送测试。

关键提醒：

细胞对温度和pH敏感，培养基复温4小时以上再使用。

收到细胞后需立即消毒、静置，并检查密度与贴壁情况，按需传代或复苏。

生物安全等级为BSL-1或2，仅限科研使用。

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