流行性造血器官坏死病病毒（EHNV）检测试剂盒（PCR-荧光探针法）

商品属性：

流行性造血器官坏死病病毒（EHNV）检测试剂盒（PCR-荧光探针法）是一种用于快速、灵敏检测EHNV核酸的分子诊断工具，主要应用于水产动物疫病检测。以下是其详细说明：

检测原理

基于实时荧光定量PCR技术，针对EHNV基因组的保守区域设计特异性引物和荧光探针。在PCR扩增过程中，荧光信号实时监测反应体系，通过Ct值和扩增曲线判断样本中是否存在EHNV核酸

主要组成

PCR反应液：含缓冲液、dNTPs等PCR反应必需成分。

酶混合液：含逆转录酶（如需检测RNA）、Taq DNA聚合酶等。

特异性引物和探针：针对EHNV设计，探针标记荧光报告基团（如FAM）和淬灭基团。

阳性对照和阴性对照：用于验证试剂盒有效性和排除污染。

核酸提取试剂（可选）：用于从样本中提取病毒核酸。

检测流程

样本采集：采集疑似感染鱼类的组织样本（如鳃、肾、脾等）。

核酸提取：从样本中提取病毒RNA或DNA。

反转录与扩增：将RNA反转录为cDNA（如适用），并进行实时荧光定量PCR扩增，荧光信号实时记录。

结果分析：根据Ct值和扩增曲线判断样本中是否存在EHNV核酸。

结果判定

阳性：Ct值≤阈值（通常为35-40），扩增曲线呈典型S形。

阴性：Ct值>阈值或无扩增曲线，且内标正常。

无效：阴性对照异常或阳性对照无扩增曲线，需重新检测。

注意事项

严格分区操作（试剂准备区、样本处理区、扩增区）以防止交叉污染。

核酸提取和PCR反应需在生物安全柜中进行。

试剂盒应按照说明书要求储存和使用，避免反复冻融。

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