牛结节性皮肤病（LSDV）检测试剂盒（荧光PCR法）

商品属性：

牛结节性皮肤病（LSDV）检测试剂盒（荧光PCR法）是一种基于实时荧光定量PCR技术的分子诊断工具，用于特异性检测牛结节性皮肤病病毒核酸，具有高灵敏度、高特异性和快速检测的特点。

检测原理

试剂盒采用TaqMan探针法荧光PCR技术，针对LSDV基因组中高度保守的区域（如ORF011、ORF012或P32基因）设计特异性引物和探针，

通过FAM荧光标记实时监测PCR扩增过程中的荧光信号，实现病毒核酸的定性检测。部分试剂盒还包含内参系统（如内源性对照或外源性对照），以监控样本提取质量和PCR抑制物干扰。

产品特点

高灵敏度：最低检测限可达103 Copies/mL，可检测低至10拷贝/μL的病毒核酸，显著高于传统培养法。

高特异性：引物和探针设计确保仅与LSDV发生特异性结合，避免与其他近缘物种（如水貂、狐狸等）产生交叉反应。

快速高效：整个检测过程可在2-3小时内完成，适合临床快速诊断和疫情监控。

定量能力：通过Ct值和标准曲线实现病毒核酸的相对定量分析。

应用范围

样本类型：适用于临床样本（如皮肤结节、血液、分泌物、组织匀浆）或媒介昆虫样本的核酸定性检测。

适用仪器：兼容主流荧光定量PCR仪，如ABI系列、Bio-Rad系列、Roche LightCycler 480等。

操作流程

样本采集与处理：

组织样品（如皮肤、肺、脾脏）切成小块，加入预冷PBS缓冲液匀浆，反复冻融后离心取上清液。

液体样品（如抗凝血）离心取血浆或血清。

核酸提取：使用商品化DNA提取试剂盒（如QIAGEN、Roche）操作，提取的DNA可置于2-8℃短期保存或-20℃长期保存。

注意事项与局限性

注意事项：

严格分区操作（试剂准备区、样本处理区、PCR扩增区），避免交叉污染。

试剂盒-20℃避光保存，避免反复冻融，有效期12个月。

使用一次性吸头和专用实验服，实验后用10%次氯酸或紫外灯消毒。

局限性：

样本核酸浓度低于最低检出限可能导致假阴性。

采集、运输、储存不当可能造成DNA降解（假阴性）或交叉污染（假阳性）。

阳性结果需结合临床症状和其他检测手段确诊。

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