气肿疽梭菌（CC）检测试剂盒（荧光PCR法） 新品

气肿疽梭菌（CC）检测试剂盒（荧光PCR法）

简介：

气肿疽梭菌（CC）检测试剂盒（荧光PCR法）是一种基于实时荧光定量PCR技术的核酸检测试剂盒，用于检测气肿疽梭菌（Clostridium chauvoei）的DNA，辅助诊断气肿疽感染。

核心信息如下：

检测原理：采用TaqMan探针法（或双重荧光PCR系统），设计特异性引物和探针，对气肿疽梭菌的DNA进行体外扩增。探针结合在DNA单链上

PCR扩增时Taq酶的5’端－3’端外切酶活性将探针降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，产生荧光信号，实现荧光信号累积与PCR产物形成的同步。

主要组成：常见组分包括反应液、酶液（Taq酶）、阳性质控品（无传染性的DNA片段）、阴性质控品（超纯水或TE缓冲液），部分试剂盒含预混液（如2×SYBR qPCR MasterMix）。

样本类型：适用于病变肌肉组织、水肿液、血液、血清、唾液、组织匀浆、拭子、土壤/饲料（环境监测）等。

操作流程：

DNA提取：用细菌DNA提取试剂盒（推荐溶菌酶破壁），纯化样品DNA（DNA纯化是检测灵敏度的关键）。

标准曲线制备：将阳性质控品梯度稀释（如10倍系列），用于定量分析。

PCR反应：体系通常20-30μl，加入模板DNA或标准品，反应参数一般为95℃预变性2分钟，后40个循环（95℃ 10秒→60℃ 30秒，荧光采集）。

结果判读：

阳性：检测通道Ct值≤35.0，扩增曲线呈S型或有明显指数增长。

可疑：Ct值35.0-37，需重复检测，若曲线仍增长则判为阳性。

阴性：Ct值>37或无Ct值。

质控：阴性质控品无扩增曲线，阳性质控品Ct值≤3。

性能特点：

高灵敏度：最低检测限1×103拷贝/mL或100拷贝/反应，显著高于传统培养法。

高特异性：不与其他链球菌或常见动物DNA交叉反应，特异性≥99%。

快速简便：全程1-2小时完成，操作简化，适合牧场或实验室快速诊断。

储存与有效期：-20℃避光保存，有效期12个月，避免反复冻融（不超过5次）

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