禽流感病毒H5/H7亚型(AIV-H5/H7)检测试剂盒(双重荧光PCR法) 新品

禽流感病毒H5/H7亚型(AIV-H5/H7)检测试剂盒(双重荧光PCR法)

简介：

禽流感病毒H5/H7亚型(AIV-H5/H7)检测试剂盒(双重荧光PCR法)是一种基于实时荧光定量PCR技术的分子诊断工具，用于同时检测禽流感病毒H5和H7亚型核酸。

该试剂盒通过设计针对H5和H7亚型特异性基因的引物和探针，实现高灵敏度、高特异性检测。

检测原理

采用双重荧光PCR技术，单管内同时包含两组引物和探针：

H5亚型检测（FAM通道）：靶向H5亚型禽流感病毒HA基因。

H7亚型检测（HEX/VIC通道）：特异性识别H7亚型禽流感病毒HA基因。

内参系统（ROX通道）监控全程质量，熔解曲线分析辅助结果判读。

核心组成

PCR反应液：含缓冲液、dNTPs、引物/探针混合液。

酶液：含Taq酶等。

阳性质控品：含已知浓度AIV-H5/H7核酸，用于验证扩增效率。

阴性质控品：无AIV-H5/H7核酸，用于排除污染。

操作流程

样本采集：病死禽取肝脏、脾脏、气管等组织；活禽取泄殖腔拭子或全血。

核酸提取：推荐磁珠法或离心柱法提取RNA，避免反复冻融。

试剂配制：根据样本数量计算反应体系（如20μL/管），分装PCR反应管。

PCR扩增：

仪器设置：FAM通道（H5）、HEX/VIC通道（H7），淬灭基团选择None（不选ROX校正）。

反应程序：预变性（95℃ 3分钟）；40循环（95℃ 5秒→55℃ 40秒），采集荧光信号。

结果判定：

阳性：Ct值≤35且曲线有明显指数增长期；

可疑：35＜Ct值≤38，需重复检测；

阴性：Ct值＞38或无Ct值3。

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