羊传染性胸膜肺炎（MPSG)检测试剂盒（荧光PCR法）

羊传染性胸膜肺炎（MPSG)检测试剂盒（荧光PCR法）

简介：

羊传染性胸膜肺炎（MPSG）检测试剂盒（荧光PCR法）是一种用于快速、灵敏检测羊传染性胸膜肺炎支原体（Mycoplasma ovipneumoniae）的分子生物学工具。以下是其详解说明：

检测原理：

采用TaqMan探针法实时荧光PCR技术，针对羊传染性胸膜肺炎支原体的特异性基因序列设计引物和探针，

通过荧光信号实时监测PCR扩增过程，实现对病原体核酸的定性或定量检测。

试剂组成：通常包括PCR反应液、热启动DNA聚合酶、特异性引物混合物、荧光探针、阳性对照（含目标病原体DNA）、阴性对照（无菌水或不含目标DNA的样本）等组分。

样本类型：可检测气管分泌物拭子、肺组织等样本。样本采集后需及时处理和保存，避免核酸降解。

检测步骤：

4.1. 样本处理：提取样本中的DNA，作为PCR反应的模板  。

4.2. 反应体系配置：将提取的DNA模板、PCR反应液、引物、探针等组分按比例混合，配置成PCR反应体系。

4.3. PCR扩增：将反应体系置于荧光定量PCR仪中，按照设定的程序进行扩增和荧光信号采集。

4.4. 结果分析：通过分析荧光信号的强度和扩增曲线，判断样本中是否含有羊传染性胸膜肺炎支原体的DNA，并可进行定量分析。

结果判断：

阳性：检测通道Ct值≤阈值（如40），且曲线有明显的指数增长曲线。

阴性：样本检测结果无Ct值，且无特异性扩增曲线。

可疑：Ct值接近阈值，建议重复检测确认。

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注意事项：

严格防止交叉污染，区分试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区。

操作时佩戴手套、口罩和实验服，使用一次性枪头和离心管。

试剂盒组分应避免反复冻融，按照说明书建议的温度储存。

该试剂盒具有高灵敏度、高特异性和快速检测的优点，适用于兽医临床诊断、流行病学调查和科学研究等领域。

检测性能优势

高灵敏度

最低检出限达100-500拷贝/mL，显著高于传统培养法（需10-10 CFU/mL）。

强特异性

采用荧光探针法，避免与其他链球菌交叉反应，特异性≥99%。