寨卡（zika）病毒检测试剂盒（荧光PCR法）

商品属性：

核心概述

检测目标：寨卡病毒RNA。寨卡病毒是一种主要通过蚊媒传播的黄病毒属病毒，感染后可导致新生儿小头畸形和格林-巴利综合征等严重神经系统疾病。

技术原理：实时荧光逆转录PCR。这是一种将病毒的RNA逆转录为cDNA，再通过荧光PCR进行扩增和检测的技术。

核心价值：实现对寨卡病毒感染的早期、快速和精准诊断，这对于疫情监控、患者管理和孕妇健康咨询至关重要。

二、 检测意义与临床应用

寨卡病毒感染症状（发热、皮疹、关节痛等）与登革热、基孔肯雅热等疾病高度相似，临床鉴别困难。该试剂盒的主要应用场景包括：

疑似病例确诊：对出现相关症状，特别是有关流行病学史（如疫区旅行史）的患者进行确诊。

孕妇监测：对去过疫区的孕妇进行检测，评估胎儿可能面临的风险。

输入性病例监测与防控：在口岸和机场对来自疫区的人员进行筛查，防止疫情输入和扩散。

献血筛查：确保血液安全，防止通过输血传播。

流行病学调查：追踪病毒传播链，了解疫情分布。

三、 技术原理 - 荧光PCR法

其核心技术原理如下：

核酸提取：从临床样本（如血清、血浆、尿液、羊水 等）中提取病毒总RNA。尿液样本的检测窗口期通常比血清更长。

逆转录：在试剂盒中的逆转录酶作用下，将寨卡病毒的RNA基因组逆转录为互补的cDNA。

特异性引物与探针：

引物：根据寨卡病毒高度保守的特异性基因序列（如NS5、E基因等）设计。

TaqMan探针：这是一条寡核苷酸探针，其两端分别标记了一个报告荧光基团 和一个淬灭荧光基团。

实时荧光PCR扩增与检测：

将逆转录产物、特异性引物、TaqMan探针和PCR反应试剂混合。

在实时荧光PCR仪中进行扩增。在每轮循环的延伸阶段，Taq酶的5‘→3’外切酶活性会水解与模板结合的探针，使报告基团与淬灭基团分离，从而发出荧光。

荧光信号与扩增产物量成正比。仪器实时监测荧光强度的增长。

三、 试剂盒组成（通常包括）

RT-PCR反应液：包含逆转录酶、Taq酶、引物、探针、dNTPs、缓冲液等。

四、 操作流程详解说明

样本处理：采集患者血清、血浆或尿液等样本。

核酸提取：使用商业化的病毒RNA提取试剂盒进行提取。

配制反应体系：按照说明书，将各组分与提取的RNA模板混合于PCR管中。

上机运行：

将反应管放入实时荧光PCR仪。

设置循环程序（通常包括：逆转录→预变性→PCR循环）。

结果分析：仪器软件自动分析数据，根据Ct值和扩增曲线判定结果。

五、 性能特点

高灵敏度与特异性：能准确检测出低载量的病毒，并能有效区分寨卡病毒与其他黄病毒（如登革病毒）。

快速高效：可在2-3小时内完成检测。

安全闭管：整个检测过程无需打开管盖，极大降低了气溶胶污染的风险。

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六、 注意事项

防污染：荧光PCR极其敏感，严格的分区操作和规范的操作是防止假阳性的关键。

窗口期：在病毒血症期（症状出现后约3-7天）内检测血清效果最佳，尿液检测可延长至症状出现后2周以上。

结果解读需结合临床：阳性结果表明存在病毒核酸，提示现症感染。阴性结果不能完全排除感染，可能与采样时间不当或病毒载量过低有关。

交叉反应：需确保试剂盒能区分寨卡病毒与登革病毒等。

设备要求：需要专业的实时荧光PCR仪和配套的分析软件。