真鲷虹彩病毒（RSIV）检测试剂盒（PCR-荧光探针法）

商品属性：

产品概述

真鲷虹彩病毒检测试剂盒（PCR-荧光探针法）是一种基于实时荧光聚合酶链式反应技术的分子生物学检测工具，用于快速、灵敏、特异地检测海水养殖鱼类（如真鲷、石斑鱼、鲈鱼等）组织、脾肾等样本中的真鲷虹彩病毒核酸。

真鲷虹彩病毒是严重危害海水养殖业的病原之一，感染性强，死亡率高，尤其在夏季高水温期易爆发。该试剂盒通过对病毒特异性基因片段进行扩增和实时检测，实现对病原的精准鉴定，是水产病害防控和检疫的关键工具。

二、 检测原理

DNA提取：从鱼类的脾、肾等组织或血液中提取总DNA（RSIV是一种大型DNA病毒）。

荧光PCR扩增与检测：

在PCR反应体系中，包含针对真鲷虹彩病毒高度保守的特异性基因序列（如主要衣壳蛋白基因）设计的引物和荧光标记探针。

探针两端分别标记有报告荧光基团和淬灭荧光基团。当探针完整时，荧光信号被淬灭。

在PCR扩增过程中，当探针与病毒DNA模板结合后，Taq酶的5'→3'外切酶活性会将其水解，使报告荧光基团与淬灭基团分离，从而释放出荧光信号。

实时荧光PCR仪在每一个循环结束后检测该荧光信号。信号的强度与PCR反应中产生的目标DNA片段量成正比。

当荧光信号积累到超过预设的阈值时，所对应的循环数称为Ct值。样品中起始的病毒DNA越多，Ct值出现得就越早。

结果判读：

阳性：检测通道出现典型的S型扩增曲线，且Ct值小于或等于试剂盒规定的临界值。表明样本中含有真鲷虹彩病毒核酸。

阴性：无特异性扩增曲线或Ct值大于临界值。表明样本中未检测到病毒核酸或病毒载量低于检测限。

三、 试剂盒组成

一个典型的试剂盒包含：

PCR反应液：含有针对RSIV特异性基因设计的引物和荧光探针、dNTPs、缓冲液等。

热启动Taq DNA聚合酶

阳性对照：含有RSIV特异性基因片段的质粒DNA或灭活病毒DNA。

阴性对照：无菌水或非感染鱼组织DNA。

四、 技术特点与优势

高灵敏度：能够检测出样本中极微量的病毒DNA，非常适合潜伏期感染或无症状携带鱼的筛查。

卓越的特异性：能准确鉴定真鲷虹彩病毒，并可有效区分其他鱼类虹彩病毒，如传染性脾肾坏死病毒。

快速高效：整个检测过程可在2-3小时内完成，远快于病毒细胞分离培养法（需数周）。

定量能力：通过标准曲线，可以实现对病毒载量的相对或绝对定量，有助于评估感染严重程度和疫情风险。

安全性高：无需进行活病毒操作，降低了生物安全风险。

自动化与高通量：可与自动化核酸提取系统和实时PCR仪配套，实现大量样本的快速筛查。

五、 应用场景

苗种检疫：对引进的鱼苗、鱼种进行严格病毒筛查，防止病原传入。

亲本筛查：筛选无病毒感染的亲鱼，从源头上控制病毒的垂直传播。

疫情诊断与监测：对养殖场中出现的异常死亡鱼群进行快速确诊，并及时监测群体带毒情况。

出口检验：确保出口的活鱼或鱼制品符合目的国的健康标准。

流行病学调查：研究病毒的宿主范围、地理分布和传播规律。

六、 局限性

需要专业设备和人员：依赖实时荧光PCR仪和专业的分子生物学实验室操作。

无法区分感染性病毒颗粒：检测的是病毒的遗传物质，无法判断检出的核酸是来自具有感染能力的完整病毒，还是病毒碎片。因此，在评估风险时需结合其他指标。

易受污染：PCR技术极其敏感，实验操作不当容易产生气溶胶污染，导致假阳性结果，因此必须在分区实验室严格操作。

成本较高：相较于组织病理学检测等方法，其试剂和设备成本更高。

公司正在出售的产品：