猪蓝耳病病毒经典型(PRRSV-C)检测试剂盒(荧光PCR法)

商品属性：

试剂盒核心定位与背景

检测目标：

PRRSV经典型毒株（PRRSV-C）：特异性检测美洲型经典毒株（如VR-2332、ATCC VR-2402），区别于高致病性毒株（HP-PRRSV）和重组变异株（如NADC30-like）。

技术标准：

符合《GB/T 35911-2023 猪繁殖与呼吸综合征诊断技术》中荧光PCR法要求，适配2025年新修订的农业农村部检测规范。

临床意义：

精准识别经典毒株感染，避免与疫苗株（如Ingelvac PRRS MLV）或变异株混淆，为猪场净化提供分子依据。

二、技术原理与创新设计

1. 靶标基因选择

ORF7（核衣壳蛋白基因）：高度保守区域（如nt 120-200），确保经典毒株全覆盖。

NSP2特征位点：排除HP-PRRSV（30aa缺失）和NADC30-like（重组断裂点）干扰。

2. 探针优化

MGB-TaqMan探针：针对ORF7的5'端设计（FAM标记），检测限低至3拷贝/μL（2025年验证数据）。

内参系统：猪β-actin基因（HEX通道），监控样本降解与PCR抑制。

三、性能参数与行业对比

指标  本试剂盒性能  要求

灵敏度  3拷贝/μL  ≤10拷贝/μL

特异性  100%（含12种猪病原验证）  ≥95%

批内变异  CV≤2%  CV≤5%

符合率  与Sanger测序一致性99.2%  ≥90%

四、应用场景与季节防控

临床诊断：

适用于经典毒株引起的轻度呼吸道症状（与HP-PRRSV的急性高热区分）。

疫苗效果评估：

监测免疫后野毒感染（如VR-2332野毒与MLV疫苗株的ORF7序列差异）。

净化场认证：

2025年国内核心种猪场要求PRRSV-C抗原阴性率≥95%。

当前季节建议（2025年10月）：

秋季昼夜温差大，经典毒株易与支原体协同感染，建议配合猪肺炎支原体检测试剂盒使用。

五、操作规范与质控要点

样本处理：

优选样本：肺组织、扁桃体（病毒载量高）；血清需避免溶血（游离血红蛋白抑制PCR）。

扩增程序：

采用一步法RT-PCR（50℃ 15min → 95℃ 2min → 40循环），适配快速PCR仪。

结果判读：

阳性阈值：Ct≤38且扩增曲线呈S型；

灰区样本（Ct 38-40）：建议重复检测或测序确认。

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