猪流感病毒H1N1亚型(SIV- H1N1)检测试剂盒（双重荧光PCR法） 新品

猪流感病毒H1N1亚型(SIV- H1N1)检测试剂盒（双重荧光PCR法）

简介：

本试剂盒采用双重荧光PCR技术，可同时检测猪流感病毒H1N1亚型的HA和NA基因，具有以下特点：

双重靶标检测：针对HA和NA基因设计特异性引物探针，提高检测可靠性

高灵敏度：检测限可达5-10拷贝/μL

高特异性：不与H3N2等其他猪流感亚型交叉反应

快速高效：从样本处理到结果分析约90分钟

鉴别诊断：可区分经典H1N1和变异株

二、技术原理：

靶基因选择：

HA基因（血凝素）：FAM荧光通道检测

NA基因（神经氨酸酶）：HEX/VIC荧光通道检测

探针设计：

采用TaqMan-MGB探针技术

针对H1N1亚型高度保守区域

扩增程序：

一步法RT-PCR，整合逆转录和PCR扩增

45个循环的实时荧光监测

三、试剂盒组成：

组分  规格  功能  保存条件

2×RT-PCR预混液  1.2mL  含逆转录酶和热启动Taq酶  -20℃

H1N1引物探针混合液  300μL  HA和NA基因检测  -20℃

阳性对照  200μL  含H1N1 RNA片段  -70℃

阴性对照  1mL  无核酸酶水  室温

内参对照  200μL  监控RNA提取和扩增  -20℃

四、操作流程：

样本处理（25分钟）：

采集鼻拭子、肺组织或支气管肺泡灌洗液

使用配套RNA提取试剂提取病毒RNA

反应体系配制（15分钟）：

按25μL体系配制：

预混液 12.5μL

引物探针混合液 2.5μL

模板RNA 5μL

无核酸酶水 5μL

PCR扩增（50分钟）：

逆转录：50℃ 10分钟

预变性：95℃ 3分钟

循环扩增（45个循环）：

95℃ 10秒

60℃ 30秒（荧光采集）

五、结果判读标准：

结果类型  HA通道(FAM)  NA通道(HEX/VIC)  临床意义

阳性  Ct≤36  Ct≤36  H1N1感染

单通道阳性  Ct≤36  阴性/无效  需复检

阴性  无扩增  无扩增  未感染

可疑  36<Ct≤40  36<Ct≤40  需复测

注：需同时满足内参对照有效（Ct≤35）

公司正在出售的产品：

六、应用价值：

疫情监测：猪群H1N1流感暴发快速确认

变异株筛查：监测HA和NA基因匹配情况

进出口检疫：活猪及产品检疫

疫苗评估：疫苗株与流行株匹配度分析

公共卫生：人畜共患风险预警

七、注意事项：

实验应在BSL-2实验室进行，防止气溶胶污染

采样后24小时内检测或立即-70℃保存

定期校准荧光定量PCR仪光学系统

临床诊断需结合流行病学调查和病理变化

试剂反复冻融不超过3次