转基因玉米品系Bt11检测试剂盒（PCR-荧光探针法） 新品

商品属性：

试剂盒组成

核心组分

引物探针混合液：针对Bt11外源基因（如PAT）和玉米内源基因（如ZSSIIb）设计的特异性引物及荧光探针。

PCR反应液：含dNTPs、Taq DNA聚合酶、缓冲液等扩增必需成分。

阳性对照：含Bt11基因的DNA片段，用于验证实验有效性。

阴性对照：无模板对照（NTC），用于排除污染。

辅助试剂与耗材

DNA提取试剂（如裂解液、磁珠等），部分试剂盒需自备核酸提取仪。

三、检测原理

靶标基因选择

外源基因：Bt11品系特有的PAT基因（草丁膦抗性基因）或其连接区序列。

内源基因：玉米内参基因（如ZSSIIb），用于确认样本DNA质量。

荧光探针机制

探针5'端标记荧光报告基团（如FAM），3'端标记淬灭基团（如BHQ1）。PCR扩增时，Taq酶的5'→3'外切酶活性切割探针，释放荧光信号，通过Ct值定量分析靶标DNA含量。

四、操作流程

样本处理与DNA提取

玉米样本需研磨破碎，采用试剂盒提供的裂解液（含盐酸胍、SDS等）快速裂解细胞，结合磁珠纯化DNA。

阴性/阳性对照直接使用试剂盒提供的标准品。

PCR扩增

反应体系：20-25μL体系，含反应液、引物探针、模板DNA及酶。

扩增程序：

预变性：95℃ 2分钟；

循环扩增：95℃ 15秒，60℃ 30秒（40循环）；

熔解曲线分析（可选）。

结果判读

定性检测：Ct值≤35为阳性，≥40为阴性；若35<Ct<40需重复实验。

定量检测：根据标准曲线（如102-10?拷贝/μL梯度稀释）计算样本DNA浓度。

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五、技术特点

高特异性

引物探针针对Bt11基因保守区设计，避免与其他转基因品系（如GA21、NK603）交叉反应。

灵敏度高

最低检测限可达10拷贝/μL，可识别0.1%以上的转基因成分。

快速高效

全程仅需2小时（传统酚氯仿法需2天），支持闭管操作减少污染风险。

兼容性强

适用于多种样本类型（叶片、种子、加工产品）及自动化设备。

六、应用领域

科研实验：转基因玉米品系鉴定、转基因污染监测。

质量控制：进出口检验、加工食品成分筛查。

现场检测：结合微流控芯片技术，可实现“样本进-结果出”的便携式检测。