8305C（人甲状腺癌细胞（未分化））

                                                              8305C（人甲状腺癌细胞（未分化））
产品信息：

别称 8305c;8305-C;8305C_1

种属 人

生长特性 贴壁细胞

细胞形态 上皮细胞样

冻存条件 冻存液： 无血清非程序冻存液

温度：液氮

培养方案A（默认） 生长培养基：MEM（含NEAA）+10% FBS+1% P/S

培养条件：气相：空气，95%；CO₂，5%, 温度：37℃

推荐传代比例 1:3-1:5

推荐换液频率 2-3次/周

参考资料(来源文献)

背景描述 Established from the primary tumor of a 67-year-old woman with primary thyroid carcinoma (undifferentiated carcinoma, composed of spindle, polygonal and giant cells).

年龄（性别） 67Y;Female

组织来源 甲状腺癌

细胞类型 肿瘤细胞

肿瘤类型 甲状腺癌细胞

生物安全等级 BSL-1

实验步骤：

一、细胞复苏

‌快速解冻‌：将冻存管从液氮中取出后立即浸入37℃水浴，1分钟内完成解冻（避免冰晶重结晶）‌。

‌离心处理‌：900-1000rpm离心5分钟，弃上清后加入1mL培养基重悬细胞‌。

‌接种培养‌：将细胞悬液转移至T25培养瓶，补加培养基至5-6mL，37℃、5%CO₂静置培养‌。

二、细胞传代

‌消化条件‌：使用0.25%胰酶室温消化1-3分钟，显微镜下观察细胞回缩变圆后终止消化‌。

‌吹打技巧‌：消化后需轻柔吹打避免细胞成团，首次传代建议1:2比例分瓶‌。

‌换液周期‌：每周2-3次，细胞密度达80%-90%时需传代‌。

三、冻存操作

‌冻存液配方‌：10% DMSO + 40% FBS + 50%基础培养基（MEM或DMEM）‌。

‌冻存程序‌：以-1℃/分钟梯度降温至液氮表面，最终投入液氮长期保存‌。

培养注意事项：

一、细胞接收与初期处理

‌签收检查‌：收到细胞后需立即观察培养瓶状态，若出现漏液或破损需拍照记录并联系供应商‌。

‌稳定培养‌：75%酒精消毒后，37℃培养箱静置2-4小时稳定细胞状态，首次传代建议在密度达80%-90%时进行‌。

‌污染检测‌：需确认支原体、细菌、真菌检测为阴性，若发现异常需立即处理‌。

二、传代与消化操作

‌消化控制‌：室温下用0.25%胰酶消化1-3分钟，显微镜下观察细胞回缩变圆后终止，避免过度消化导致活性下降‌。

‌吹打技巧‌：消化后细胞易成团，需轻柔吹打至单细胞悬液，首次传代推荐1:2比例分瓶‌。

‌换液频率‌：每周2-3次换液，维持培养基pH稳定‌。

三、冻存与复苏要点

‌冻存液配方‌：10% DMSO + 40% FBS + 50%基础培养基，以-1℃/分钟梯度降温至液氮保存‌。

‌复苏速度‌：冻存管需在37℃水浴中快速解冻（1分钟内），离心重悬后接种以提高存活率‌。

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