兔CD40elisa试剂盒

商品属性

规格： 48孔/96孔 (48T/96T)

检测目的： 测定兔血清、血浆及相关液体样本中可溶性CD40 (sCD40) 的含量。

实验原理

采用 双抗体夹心法 (Sandwich ELISA)。

步骤简述：

用特异性兔sCD40抗体包被微孔板（固相抗体）。

加入待测样本或标准品（sCD40抗原）。

加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的特异性抗体（酶标抗体），形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

彻底洗涤，去除未结合物。

加入底物3,3',5,5'-四甲基联苯胺（TMB）。在HRP催化下，TMB显蓝色。

加入终止液（通常是强酸，如硫酸），反应终止，蓝色转化为黄色。

在450 nm波长下用酶标仪测定吸光度（OD值）。

计算： 待测样本中sCD40的浓度与OD值呈正相关。通过绘制标准品浓度与OD值的标准曲线，即可计算出样本中sCD40的浓度。

试剂盒组成 

酶标包被板 (Pre-coated Microplate)： 96孔或48孔，已包被特异性抗体。

标准品 (Standards)： 已知浓度的sCD40标准溶液（如包含数个梯度浓度的小瓶）。

样本稀释液 (Sample Diluent)： 用于稀释血清、血浆等样本。

检测抗体/酶标试剂 (Detection Antibody/Conjugate)： HRP标记的特异性抗体。

浓缩洗涤液 (Wash Buffer Concentrate)： 如20倍、25倍浓缩液，使用前需按说明书稀释。

显色底物 (Substrate Solution)： 通常是TMB溶液。

终止液 (Stop Solution)： 通常是酸性溶液（如1M或2M H₂SO₄）。

封板膜 (Plate Sealer)： 用于孵育过程密封微孔板。

产品说明书 (Instruction Manual)。

样本要求

适用样本类型： 兔血清、血浆及相关液体样本。

样本收集与处理： 需按标准操作规范进行，避免反复冻融，通常建议离心去除颗粒物。具体处理方法应参考购买的试剂盒说明书。

关键操作注意事项

严格按照说明书操作： 各品牌试剂盒浓度、孵育时间、温度等细节可能有差异。

标准曲线至关重要： 必须每次实验都绘制标准曲线。

洗板要充分、彻底： 这是降低背景、保证精度的关键步骤。

避免污染和交叉污染： 使用干净吸头，不同浓度标准品及样本使用不同吸头，避免酶标试剂接触金属器械。

注意安全： 终止液通常为强酸，需小心操作。

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