兔FGF-1/FGF acidacelisa试剂盒

商品属性

预期用途  
定量检测兔血清、血浆、细胞培养上清液或其他生物体液中的兔FGF acidic / FGF-1蛋白。

原理 (Principle): 双抗体夹心酶联免疫吸附法 (Sandwich ELISA)。一个针对兔FGF-1的特异性抗体预先包被在微孔板上。样品/标准品中的兔FGF-1与包被抗体结合后，被加入的生物素标记的检测抗体识别，再与辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素结合，最后通过底物显色进行定量。

试剂盒组分

预包被抗体的微孔板 (Microwell Plate)

FGF-1标准品 (Standard)

检测抗体 (Detection Antibody, 通常为生物素标记 Biotin-conjugated)

酶结合物 (Streptavidin-HRP)

洗涤缓冲液 (Wash Buffer, Concentrate)

底物溶液 (Substrate Solution, TMB 或类似)

终止液 (Stop Solution, 通常是酸)

封板膜 (Plate Sealers)

有时还包括样品稀释液或蛋白稳定剂。

需要但未提供的材料 (Materials Required But Not Supplied):

精密移液器及枪头

稀释样品/标准品用的试管

酶标仪 (能读取450nm吸光度，通常需要设定参考波长如570nm或630nm)

洗板机（或手工洗板装置）

去离子水或纯水

计时器

用于配制洗液的容器

吸水纸

样品准备 (Sample Preparation):

血清/血浆: 采集、离心后立即冻存于-20°C或更低。避免反复冻融。

细胞上清液: 离心去除细胞碎片后检测或冻存。

其他样本: 需按说明书要求处理。

可能需要稀释样本以使其浓度处于标准曲线范围内。

实验流程

准备好所有试剂、标准品和样本。

将标准品和样品加入微孔板。

温育。

洗板。

加入生物素标记的检测抗体。

温育。

洗板。

加入酶结合物(SA-HRP)。

温育。

洗板。

加入底物溶液显色。

温育避光。

加入终止液终止反应。

在规定时间内（通常数分钟内）用酶标仪读取450nm（或指定波长）吸光度(OD值)。

结果计算 (Calculation of Results):

绘制标准曲线：以标准品浓度为横坐标(X轴)，平均OD值（或减去空白OD值）为纵坐标(Y轴)。通常使用四参数逻辑曲线(4-PL)或对数坐标的线性回归拟合。

根据样品的OD值，从标准曲线上查出对应的FGF-1浓度。

考虑样品稀释倍数，计算原始样品中的实际浓度。

性能参数

灵敏度 (Sensitivity)/最低检测限 (Limit of Detection, LoD): 通常在 pg/mL 级别 (如 < 10 pg/mL)。

检测范围 (Assay Range): 覆盖生理或实验条件下的浓度范围 (如 31.2 - 2000 pg/mL)。

精密度 (Precision): 批内变异系数(Intra-assay CV)和批间变异系数(Inter-assay CV)通常要求低于一定百分比(如 < 10%或 < 15%)。

特异性 (Specificity): 通常说明对兔FGF-1特异，不与其他相关因子（如FGF-2/bFGF、其他种属FGF-1等）交叉反应。

回收率 (Recovery): 在说明认可的基质（如血清）中添加已知浓度的标准品，预期回收率在一定合理范围(如80%-120%)。

储存条件

各组分具体储存条件不同（通常为2-8°C、-20°C或室温）。收到试剂盒后应按说明书要求立即分装储存未使用的标准品和冻干组分（若适用）。

配制的洗涤液、工作液可能需2-8°C存放。

使用前将所有试剂平衡至室温。

有效期限 (Expiration Date): 标注在包装盒或瓶签上。

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