兔Endoglinelisa试剂盒

商品属性

检测范围

0.3 ng/ml - 16 ng/ml（96孔板）

样本类型

兔血清、血浆及相关液体样本

用途

仅供研究使用，定量测定样本中可溶性Endoglin含量。

检测原理（双抗体夹心法）

纯化兔Endoglin抗体包被微孔板→形成固相抗体。

加入样本/标准品→Endoglin抗原与固相抗体结合。

加入HRP标记的Endoglin抗体→形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

洗涤后加TMB显色底物→HRP催化TMB显蓝色→酸终止变黄色。

450nm波长测定OD值→浓度与颜色深度正相关→通过标准曲线计算浓度。

试剂盒组分

| 组分 | 规格 | 数量 |

| 30倍浓缩洗涤液 | 20ml | 1瓶 |

| 酶标试剂（HRP标记抗体） | 6ml | 1瓶 |

| 酶标包被板 | 12孔×8条 | 1块 |

| 样品稀释液 | 6ml | 1瓶 |

| 显色剂A液 | 6ml | 1瓶 |

| 显色剂B液 | 6ml | 1瓶 |

| 终止液 | 6ml | 1瓶 |

| 标准品（24ng/ml） | 0.5ml | 1瓶 |

| 标准品稀释液 | 1.5ml | 1瓶 |

| 说明书 | - | 1份 |

| 封板膜 | - | 2张 |

| 密封袋 | - | 1个 |

样本要求

保存条件：

采集后尽快提取，-20℃保存，避免反复冻融。

禁用样本：

含NaN₃（叠氮化钠）的样本，因其抑制HRP酶活性。

操作步骤

标准品稀释

| 浓度 (ng/ml) | 稀释方法 |

| 12 | 取150μl原倍标准品 + 150μl标准品稀释液 |

| 6 | 取150μl 12ng/ml标准品 + 150μl稀释液 |

| 3 | 取150μl 6ng/ml标准品 + 150μl稀释液 |

| 1.5 | 取150μl 3ng/ml标准品 + 150μl稀释液 |

| 0.75 | 取150μl 1.5ng/ml标准品 + 150μl稀释液 |

加样（50μl/孔）

空白孔：不加样本/酶标试剂。

标准孔：各浓度标准品。

待测孔：处理后的样本。

孵育与洗涤

37℃孵育60分钟 → 洗板5次（使用稀释后的洗涤液）。

加酶标试剂 → 37℃孵育60分钟 → 洗板5次。

显色与终止

加显色剂A液 + B液各50μl → 37℃避光显色15分钟。

加终止液50μl → 颜色由蓝变黄。

检测

15分钟内于450nm读取OD值，绘制标准曲线计算样本浓度。

注意事项

有效期：参考试剂盒标签，过期组分禁用。

操作规范：

不同批次组分不可混用；

避免显色过度（严格控制15分钟）；

洗板需彻底防止假阳性。

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