小鼠肌肌酸激酶(CKM)elisa试剂盒

                                             小鼠肌肌酸激酶(CKM)elisa试剂盒
核心信息

小鼠肌肌酸激酶(CKM) ELISA试剂盒是一种用于定量检测小鼠血清、血浆及相关生物液体中肌型肌酸激酶（CKM）含量的科研工具，广泛应用于肌肉生理、病理及相关疾病机制的研究。

 试剂盒基本原理

试剂盒采用双抗体夹心法（或生物素-亲和素法）进行检测：预先包被特异性抗CKM抗体的微孔板捕获样本中的CKM，加入样本后，再加入酶标二抗（如HRP标记的抗CKM抗体），形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物，经洗涤后加入底物（如TMB），显色反应的深浅与样本中CKM浓度呈正相关，最后通过酶标仪在450 nm波长下测定吸光度（OD值），利用标准曲线计算CKM浓度。

主要组成成分

典型试剂盒包含以下核心组分：

组分  功能

预包被CKM抗体的酶标板（96T/48T）  固相载体，捕获目标蛋白

标准品（冻干或液态）  用于绘制标准曲线

检测抗体（如HRP标记）  识别CKM并催化显色反应

显色底物（TMB A/B液）  显色反应底物

终止液（如2M硫酸）  终止反应，使颜色稳定

浓缩洗涤液（30×）  洗涤未结合物质

样品稀释液  稀释样本与标准品

保存条件与有效期

未开封试剂盒：建议保存于 -20℃（部分试剂如洗涤液、终止液需4℃保存），避免反复冻融

已开封试剂：剩余试剂需按标签温度保存，酶标板应加干燥剂密封于-20℃

有效期：通常为 6–12个月，具体以产品标签为准

?? 样本类型与处理建议

可检测的样本包括：

血清（室温凝固后离心）

血浆（EDTA/肝素抗凝）

组织匀浆（PBS清洗、研磨、离心）

细胞上清或裂解液

尿液、脑脊液等体液

注意事项：

样本采集后应尽快处理并检测，若需保存，建议分装冻存于 -20℃或-80℃，避免反复冻融

操作关键步骤（简要流程）

标准品稀释：按说明书梯度稀释，设置标准孔

加样：设空白孔、标准孔、样本孔，加样后37℃温育30分钟

洗涤：使用洗涤液洗板5次，去除未结合物

加酶标抗体：每孔加入50–100 μL，37℃反应30–60分钟

显色与终止：加入TMB底物，37℃避光显色10–15分钟，加终止液

读数与计算：450 nm测定OD值，绘制标准曲线，计算样本浓度

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