小鼠FGF-6elisa试剂盒

产品概述

本试剂盒采用双抗体夹心法（ELISA）定量检测小鼠样本中的成纤维细胞生长因子6（FGF-6），适用于血清、血浆、组织匀浆等生物样本的体外检测。

试剂盒组成

预包被微孔板：96孔板，包被抗小鼠FGF-6抗体。

标准品：重组小鼠FGF-6冻干粉（需按说明书稀释）。

检测抗体：生物素标记的抗小鼠FGF-6抗体。

酶结合物：辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素。

显色底物（TMB）：15 mL。

终止液：1N硫酸（12 mL）。

洗涤缓冲液（40×浓缩）：含PBS、Tween-20，需稀释后使用。

样本稀释液：含BSA的缓冲液。

实验前准备

仪器要求：酶标仪（450 nm滤光片）、微量移液器、恒温箱（37±1°C）、洗板机或手动洗瓶。

试剂配制：

洗涤缓冲液：1份浓缩液加39份蒸馏水。

标准品梯度稀释：按说明书用样本稀释液配制。

操作步骤

加样：分别加入标准品、待测样本至对应孔（100 μL/孔），37°C孵育2小时。

洗涤：弃液后每孔加洗涤液300 μL，静置30秒后弃去，重复3次。

加检测抗体：每孔加入生物素化抗体（100 μL），37°C孵育1小时，再次洗涤。

加酶结合物：每孔加入HRP标记物（100 μL），37°C避光孵育30分钟，洗涤。

显色：每孔加TMB底物（90 μL），避光反应15~30分钟。

终止与检测：每孔加终止液（50 μL），立即用酶标仪测定450 nm吸光度。

结果计算

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，通过曲线方程计算样本中FGF-6浓度。

注意事项

避免反复冻融标准品或样本。

终止液为强酸，需谨慎操作。

显色时间过长可能导致背景过高，建议优化反应时间。

储存条件

未开封试剂盒2~8°C保存；开封后标准品及酶结合物需分装冻存（-20°C）。

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