人PECAM-1elisa试剂盒

商品属性

检测原理

本试剂盒采用双抗体夹心ABC-ELISA法。通过抗人PECAM-1单克隆抗体预包被酶标板，样本中的PECAM-1与固相抗体结合后，加入生物素化抗人PECAM-1抗体形成复合物，再通过辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素与生物素结合，经TMB底物显色。终止反应后，在450nm波长下测定吸光度（OD值），PECAM-1浓度与OD值呈正相关，可通过标准曲线定量。

试剂盒组成（2-8℃保存）

预包被酶标板：96孔

酶标抗体工作液：12mL

10×标本稀释液：12mL

20×浓缩洗涤液：50mL（使用前需蒸馏水稀释）

PECAM-1标准品：50ng/瓶（2瓶）

TMB底物工作液：12mL

生物素化抗体工作液：12mL

终止液（硫酸溶液）：12mL

操作步骤

样本准备：血清、血浆或细胞培养上清液需离心去除颗粒物，避免反复冻融。

加样：

标准品孔：依次加入梯度稀释的标准品（建议浓度：50、25、12.5、6.25、3.125、1.562、0.781、0 ng/mL）100μL。

待测样本孔：加入100μL样本（建议复孔检测）。

空白对照孔：仅加样本稀释液。

孵育：37℃反应120分钟，洗涤4-6次（每次浸泡30秒，拍干）。

加生物素化抗体：每孔100μL，37℃孵育60分钟，洗涤。

加酶标抗体：每孔100μL，37℃避光反应30分钟，洗涤。

显色：每孔加入TMB底物100μL，37℃避光反应15分钟。

终止与检测：每孔加入终止液100μL，30分钟内测定450nm OD值。

结果计算

扣除空白孔OD值后，以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线（建议四参数拟合）。

根据样本OD值从曲线中计算PECAM-1浓度，若样本稀释需乘以稀释倍数。

性能参数

灵敏度：最低检测限<0.1ng/mL。

特异性：仅检测人PECAM-1，与其它细胞因子无交叉反应。

重复性：板内、板间变异系数（CV）均<10%。

注意事项

试剂使用前需平衡至室温，避免反复冻融。

洗涤需彻底，防止残留物干扰结果。

开封后未使用的板条需密封防潮保存。

仅限科研用途，不可用于临床诊断。

保存条件

未开封试剂盒4℃保存，开封后按组分要求存放（酶标板需干燥剂密封）。

公司出售的产品