大鼠Erythropoietinelisa试剂盒

检测目标：定量测定大鼠血清、血浆、细胞裂解液、细胞培养物上清或其他相关液体中的Erythropoietinelisa含量。

检测原理：双抗体夹心酶标免疫分析法。

检测步骤

包被抗体

用纯化的抗大鼠Erythropoietinelisa抗体包被微孔板，形成固相抗体。

加样与反应

依次向微孔中加入待测样本（如血清、血浆）或标准品；

加入生物素标记的抗大鼠Erythropoietinelisa抗体；

加入HRP标记的亲和素。

洗涤

每步骤间彻底洗涤去除未结合物质。

显色

加入底物TMB（四甲基联苯胺），在过氧化物酶催化下产生蓝色→黄色（加酸终止后）。

读数与计算

用酶标仪在450nm波长检测OD值；

根据标准曲线计算样本中Erythropoietinelisa浓度。

标准品配置方法（关键操作）

标准品原液浓度为 120 mU/mL，使用前需反复颠倒/搓动混匀。

梯度稀释（临用前15分钟内配制）：

原液（120 mU/mL）作为最高浓度；

用样品稀释液倍比稀释成系列浓度：

120 → 60 → 30 → 15 → 7.5 → 3.75 → 1.87 mU/mL；

样品稀释液直接作为 0 mU/mL 空白对照。

注意事项

适用范围：仅供科研使用，不可用于临床诊断。

样本处理：避免反复冻融，血浆样本需用肝素或EDTA抗凝。

结果计算：推荐使用软件（如Excel）拟合标准曲线（浓度-OD值对数坐标），再计算样本浓度。

主要保存条件（补充建议）

未开封试剂：2–8°C保存（有效期参考包装标注）；

已配标准品/试剂：建议分装后–20°C冻存，避免反复冻融。

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