人a-2-Macroglobulinelisa试剂盒

商品属性

预期用途

本试剂盒采用酶联免疫吸附法（ELISA）定量检测人血清、血浆或其他生物体液中的α-2-巨球蛋白（A2M）浓度，适用于科研用途，不用于临床诊断。

检测原理

采用双抗体夹心法：

包被：抗人A2M单克隆抗体预包被于酶标板孔。

结合：样本中的A2M与包被抗体结合，加入生物素标记的检测抗体形成复合物。

信号放大：辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素与生物素结合，催化底物TMB显色（蓝色→黄色）。

定量：450nm波长测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样本中A2M浓度。

试剂盒组成（2-8℃保存）

| 组分 | 规格/数量 |

| 预包被酶标板 | 96孔 |

| A2M标准品 | 6浓度梯度×1瓶 |

| 生物素化检测抗体 | 12 mL |

| HRP标记链霉亲和素 | 12 mL |

| 10×标本稀释液 | 20 mL |

| 20×浓缩洗涤液 | 50 mL |

| TMB底物溶液 | 10 mL |

| 终止液（2M H₂SO₄） | 10 mL |

样本处理

血清/血浆：采集后离心（3000 rpm, 10分钟），避免溶血或反复冻融。

细胞上清液：离心去除颗粒物，-20℃保存（长期需-80℃）。

操作步骤

稀释：用稀释液将样本按1:100预稀释（根据预期浓度调整）。

加样：每孔加入100μL标准品或样本，37℃孵育90分钟。

洗涤：弃液后加入1×洗涤液（20×浓缩液稀释），重复3次。

检测抗体：每孔加100μL生物素化抗体，37℃孵育60分钟。

酶结合物：加入HRP标记链霉亲和素，37℃孵育30分钟。

显色：加入TMB底物，避光反应15分钟，终止后读取OD值。

注意事项

试剂使用前需平衡至室温，避免交叉污染。

标准曲线需每次实验重新绘制，建议复孔检测。

若OD值超出标准曲线范围，需调整样本稀释比例。

计算与结果

以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制曲线（四参数拟合）。

样本浓度=曲线对应值×稀释倍数（单位：μg/mL或nmol/L）。

性能参数

灵敏度：≤0.1 ng/mL

检测范围：0.5-100 ng/mL

批内/批间变异系数：<10%

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