人Fetuin-Aelisa试剂盒

商品属性

检测原理：采用固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA），通过特异性抗体结合待测样本中的Fetuin-A，经酶标显色反应测定其浓度，吸光度（OD值）与样本中Fetuin-A含量呈正相关。

试剂盒组成

预包被微孔板：96孔（或48孔），包被抗人Fetuin-A单克隆抗体。

标准品：浓度梯度为0–2000 ng/mL（冻干粉或液体），需按说明书稀释。

检测抗体：生物素标记的抗人Fetuin-A抗体（1×）。

酶结合物：链霉亲和素-HRP（1×）。

显色底物：TMB溶液（A/B液）。

终止液：2M硫酸溶液。

洗涤缓冲液：20×浓缩液，需稀释后使用。

样本稀释液：适用于血清/血浆样本的缓冲液。

样本要求

样本类型：血清、血浆（EDTA/肝素抗凝）。

采集处理：离心去除颗粒物，避免反复冻融（-80℃保存≤3个月）。

稀释比例：通常建议1:100，具体需预实验优化。

操作步骤

标准品稀释：按说明书梯度稀释至工作浓度。

加样：每孔加入标准品或样本100 μL，37℃孵育1小时。

洗涤：弃液后加洗涤液洗板5次。

加检测抗体：每孔加入生物素化抗体100 μL，37℃孵育30分钟。

加酶结合物：每孔加入HRP标记物100 μL，避光孵育20分钟。

显色：加入TMB底物，室温避光反应15分钟。

终止与检测：加入终止液，450 nm波长读取OD值。

结果计算

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线。

通过曲线方程计算样本浓度，乘以稀释倍数即为实际值。

注意事项

保存条件：未开封试剂盒2–8℃保存；开封后酶标板需密封防潮。

质量控制：建议每板设置复孔及阴/阳性对照。

干扰因素：溶血、脂血样本可能影响结果准确性。

适用范围：科研用途，适用于血清Fetuin-A水平检测（如代谢疾病、肿瘤研究等）。

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