兔白介素6(IL-6)ELISA试剂盒

商品属性

产品用途

本试剂盒用于定量检测兔血清、血浆、组织匀浆或其他生物液体样本中白介素6（IL-6）的浓度，适用于科研实验，不适用于临床诊断。

实验原理

采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。将兔IL-6特异性抗体预包被于微孔板中，加入待测样本后，样本中的IL-6与固相抗体结合。洗涤后加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经洗涤去除未结合物，加入底物TMB显色，在HRP催化下产生蓝色产物，终止反应后转为黄色。颜色的深浅与样本中IL-6浓度呈正相关，通过酶标仪测定450 nm波长下的吸光度（OD值），依据标准曲线计算浓度。

试剂盒组成

96孔配置（示例，具体以实际包装为准）：

预包被微孔板（96孔）

标准品（冻干粉或液体）

样本稀释液

HRP标记检测抗体

TMB显色底物

终止液

洗涤缓冲液（浓缩液）

封板膜、说明书

操作步骤

标准品稀释与样本准备：按说明书梯度稀释标准品，样本需离心去除杂质。

加样：每孔加入标准品或样本，37℃孵育30分钟，洗涤3次。

加酶标抗体：加入HRP标记抗体，37℃孵育30分钟，洗涤3次。

显色：加入TMB底物，避光反应15分钟。

终止与检测：加入终止液，15分钟内测定OD值（450 nm）。

注意事项

试剂盒保存于2-8℃，避免反复冻融。

样本需新鲜采集或-20℃/-70℃保存，避免反复冻融。

操作时需佩戴防护用具，避免直接接触终止液等腐蚀性试剂。

结果计算

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，通过拟合方程计算样本浓度。

技术参数

检测范围：通常为15.6–1000 pg/mL（具体以实际试剂盒为准）。

灵敏度：≤5 pg/mL。

特异性：不与兔其他细胞因子交叉反应。

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