兔AXLelisa试剂盒

多维度检测系统：

磷酸化状态检测：采用抗兔AXL胞外区单抗（克隆AXL-3C2）作为捕获抗体，结合磷酸化酪氨酸698检测抗体（克隆pAXL-1D4），可同步检测总AXL及其激活形式

配体结合分析：通过Gas6竞争实验评估受体-配体相互作用强度

抗干扰设计：添加重组MerTK（50 ng/mL）消除家族交叉反应（验证交叉率<0.1%）

 2025年技术升级：

新增上皮-间质转化（EMT）关联检测模块（基于E-cadherin/vimentin共检）

标准品溯源至ATCC细胞系（CRL-4022）

微孔板采用仿生肿瘤微环境涂层（批间差<2.5%）

试剂盒配置与关键参数

标准组件清单：

预包被96孔板（12条×8孔独立包装，充氮保存）

重组兔AXL标准品（7梯度：0.05-50 ng/mL，含质谱鉴定证书）

检测系统：

量子点标记二抗（4℃避光稳定18个月）

电致化学发光底物（动态范围扩展25倍）

专用组织裂解液（含磷酸酶抑制剂cocktail）

性能指标：

参数  规格  生物学意义

检测范围  0.05-50 ng/mL  覆盖基础与激活态浓度

灵敏度  0.02 ng/mL  可检测单细胞水平表达

精密度  板内CV<3%，板间CV<6%  符合AAALAC标准

特异性  与Tyro3交叉反应<0.1%  确保亚型特异性

实验操作标准化流程

样本处理关键点：

组织样本：需液氮速冻后-80℃保存（避免磷酸化丢失）

稳定性数据：

4℃保存≤6小时（需立即添加抑制剂）

-80℃可保存3个月（避免反复冻融）

特殊处理：

转移灶需标注解剖位置

用药模型需标注抑制剂类型

优化操作步骤：

超声处理：冰浴脉冲超声3×5秒（功率20%）

加样策略：采用"蛇形"加样顺序

关键孵育：4℃低速振荡（200rpm）过夜

信号读取：表面等离子共振辅助检测（SPR模式）

应用研究与科学价值

疾病模型关联：

肿瘤耐药：pAXL/AXL比值>0.3预示靶向治疗抵抗（HR=2.5）

肺纤维化：BALF中>15 ng/mL与疾病进展正相关

COVID-19重症：血清水平与细胞因子风暴程度相关（r=0.71）

2025年研究前沿：

发现AXL通过PI3Kδ-AKT-mTORC1通路调控免疫检查点

双靶点抑制剂（AXL/MET）治疗NSCLC进入II期临床

单细胞质谱流式揭示肿瘤干细胞AXL+亚群特征

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