兔AFPelisa试剂盒

1. 产品概述

兔AFP ELISA试剂盒 是一种用于定量检测兔血清、血浆或其他体液（如腹水）中 甲胎蛋白（Alpha-Fetoprotein, AFP） 含量的酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒。AFP是一种重要的肿瘤标志物，在胚胎发育和某些病理状态（如肝癌）中表达升高。

2. 检测原理

采用 双抗体夹心法（ELISA）：

捕获抗体：预包被在微孔板上的抗兔AFP抗体。

样本中的AFP：与捕获抗体结合。

检测抗体：辣根过氧化物酶（HRP）标记的抗兔AFP抗体，与AFP另一表位结合，形成“抗体-抗原-抗体”复合物。

显色反应：加入TMB底物后，HRP催化显色，颜色深浅与AFP浓度成正比，通过酶标仪测定OD值计算浓度。

 主要应用

科研领域：研究兔AFP在胚胎发育、肝再生或肿瘤模型中的表达。

兽医诊断：辅助诊断兔肝脏疾病（如肝癌、肝炎）或生殖系统肿瘤。

药物开发：评估药物对AFP表达的影响。

试剂盒组成

典型试剂盒包含以下组分（具体以厂家说明书为准）：

组分  规格/数量

预包被微孔板  96孔（可拆）

兔AFP标准品  6-8个浓度梯度

HRP标记检测抗体  1瓶（浓缩或即用型）

TMB显色液  1瓶

终止液（稀硫酸）  1瓶

洗涤缓冲液（20X）  1瓶（需稀释）

样本稀释液  1瓶

5. 操作步骤（简要）

标准品稀释：用稀释液配制系列浓度标准品。

加样：标准品、待测样本加入微孔板，孵育（通常37℃ 1小时）。

洗涤：洗去未结合物质。

加检测抗体：孵育后洗涤。

显色：加入TMB，避光反应15-30分钟。

终止：加入终止液，颜色由蓝变黄。

检测：450nm波长测OD值，绘制标准曲线计算样本浓度。

6. 关键参数

检测范围：通常为1-100 ng/mL（不同品牌可能有差异）。

灵敏度：最低检测限（LOD）约0.1-0.5 ng/mL。

特异性：不与兔其他血清蛋白交叉反应。

重复性：CV（变异系数）<10%。

7. 注意事项

样本处理：避免溶血或反复冻融，离心后取上清检测。

标准曲线：每次实验需重新制备。

温度控制：孵育时避免温度波动。

安全操作：终止液为酸性，需防护。

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