兔Adiponectin/Acrp30elisa试剂盒

                                             兔Adiponectin/Acrp30elisa试剂盒
基本介绍

目标分子：脂联素（Adiponectin/Acrp30）是一种由脂肪细胞分泌的激素蛋白，分子量约30kDa，以多种聚合形式存在（低聚体、六聚体和高分子量复合物）。

生物学特性：

结构特征：含N端胶原样结构域和C端球状结构域

主要功能：

调节葡萄糖代谢和脂肪酸氧化

增强胰岛素敏感性

抗动脉粥样硬化作用

抗炎和心血管保护作用

 临床意义：

肥胖和2型糖尿病研究

代谢综合征评估

心血管疾病风险预测

检测原理

双抗体夹心ELISA法：

捕获抗体：微孔板包被抗兔Adiponectin单克隆抗体

样本孵育：样本中的Adiponectin与固相抗体结合

检测抗体：加入生物素标记的抗Adiponectin多克隆抗体

信号放大：链霉亲和素-HRP复合物结合

显色系统：TMB显色，450nm测定吸光度

试剂盒组成

组分  规格  保存条件  关键说明

预包被微孔板  96T（可拆）  2-8℃  密封干燥保存

Adiponectin标准品  0.5-50 ng/mL  -20℃  冻干粉需精准复溶

生物素标记抗体  1.2mL  -20℃  避免反复冻融

链霉亲和素-HRP  1.2mL  -20℃（避光）  使用前离心

样本稀释液  20mL  2-8℃  含蛋白稳定剂

TMB底物  10mL  2-8℃（避光）  开封后1月内使用

终止液  10mL  室温  强酸腐蚀性注意

20×洗涤缓冲液  50mL  室温  需1:19稀释使用

样本要求

适用样本类型：

血清（推荐无抗凝管）

血浆（EDTA或肝素抗凝）

脂肪组织匀浆（需特殊处理）

细胞培养上清

样本处理规范：

采集后立即离心（2000×g，15分钟，4℃）

分装储存于-80℃（避免反复冻融>3次）

检测前室温平衡，避免震荡

脂血样本需备注（可能影响检测）

检测流程

标准操作步骤：

标准品稀释：制备0.5、1、5、10、20、50 ng/mL梯度

加样：标准品/样本100μL/孔，37℃孵育2小时

洗涤：洗板5次（300μL/孔，浸泡30秒/次）

加检测抗体：100μL/孔，37℃孵育1小时

加酶复合物：100μL/孔，37℃孵育30分钟

显色：TMB避光反应15-20分钟

终止：50μL终止液

读值：450nm主波长，630nm参比波长

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