人组织因子途径抑制因子(TFPI)elisa试剂盒

                                             人组织因子途径抑制因子(TFPI)elisa试剂盒
1. 基本介绍

目标分子：组织因子途径抑制因子（Tissue Factor Pathway Inhibitor, TFPI）是凝血系统关键调控蛋白，分子量约34-40kDa，主要由血管内皮细胞合成释放。

生物学特性：

结构特征：含3个Kunitz型抑制域（分别抑制FⅦa/TF、FⅩa和FⅤa）

存在形式：

全长TFPI（TFPIα）：主要结合内皮表面

截短型（TFPIβ）：主要存在于血浆

生理功能：

抑制外源性凝血途径

调节血管内皮功能

参与炎症反应

临床意义：

血栓性疾病风险评估（DIC、深静脉血栓）

抗凝治疗监测（肝素疗效指标）

脓毒症预后标志物

动脉粥样硬化研究

 检测原理

双抗体夹心ELISA法：

捕获抗体：微孔板包被抗TFPI单抗（靶向Kunitz-1或Kunitz-3结构域）

样本反应：TFPI与固相抗体特异性结合

检测抗体：加入HRP标记的抗TFPI抗体（靶向C端）

显色系统：TMB显色，450nm/630nm双波长检测

试剂盒组成

组分  规格  保存条件  关键说明

预包被微孔板  96T（可拆）  2-8℃（带干燥剂）  避免受潮

TFPI标准品  0.5-30 ng/mL  -20℃  冻干粉含载体蛋白

样本稀释液  20mL  2-8℃  含肝素中和剂

酶标抗体  1.2mL  -20℃（避光）  HRP标记

TMB底物  10mL  2-8℃（避光）  开封后1月有效

终止液  10mL  室温  强酸注意防护

20×洗涤液  50mL  室温  含吐温-20

样本要求

适用样本类型：

血浆（推荐3.2%枸橼酸钠抗凝，9:1比例）

血清（检测游离TFPI）

细胞培养上清

样本处理规范：

采血后立即冰浴，30分钟内离心（2500×g，15分钟，4℃）

分离血浆/血清后-80℃保存（冻融≤3次）

避免使用溶血样本（血红蛋白>0.5g/dL）

肝素治疗患者样本需备注（可能影响检测）

5. 检测流程

标准操作程序：

标准曲线制备：

梯度稀释：0.5、1、2.5、5、10、20、30 ng/mL

每孔100μL，复孔检测

关键步骤参数：

孵育温度：37±0.5℃

孵育时间：

样本孵育：90±5分钟

酶标抗体：60±3分钟

洗涤程序：300μL/孔，浸泡30秒，洗5次

显色控制：TMB避光反应15±1分钟

公司正在出售的产品：