人胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)elisa试剂盒

1. 基本介绍

目标分子：胰岛素样生长因子结合蛋白2（Insulin-like Growth Factor Binding Protein 2, IGFBP-2）是IGFBP家族重要成员，分子量约34kDa，主要调控IGF-1/2的生物利用度。

生物学特性：

结构特征：含保守的N/C端结构域，中部可变区

主要来源：肝脏、中枢神经系统、多种肿瘤细胞

核心功能：

调节IGF信号通路活性

参与细胞增殖、分化与凋亡

影响葡萄糖代谢和骨形成

与肿瘤发生发展密切相关

 临床意义：

生长发育评估（儿童GH/IGF轴功能）

肿瘤标志物（胶质瘤、前列腺癌、乳腺癌等）

代谢性疾病研究（肥胖、糖尿病）

神经系统疾病监测（阿尔茨海默病）

2. 检测原理

双抗体夹心ELISA法：

捕获抗体：微孔板包被抗IGFBP-2单抗（靶向N端表位）

样本反应：IGFBP-2与固相抗体特异性结合

检测抗体：加入HRP标记的抗IGFBP-2抗体（靶向C端）

显色系统：TMB显色，450nm/630nm双波长检测

3. 试剂盒组成

组分  规格  保存条件  关键说明

预包被微孔板  96T（8×12）  2-8℃  密封干燥保存

IGFBP-2标准品  0.5-50 ng/mL  -20℃  冻干粉需精准复溶

HRP标记抗体  1.2mL  -20℃（避光）  避免反复冻融

样本稀释液  20mL  2-8℃  含蛋白稳定剂

TMB底物  10mL  2-8℃（避光）  开封后1月内使用

终止液  10mL  室温  强酸腐蚀性注意

20×洗涤液  50mL  室温  需1:19稀释使用

4. 样本要求

适用样本类型：

血清（推荐无抗凝管，室温凝固30分钟后离心）

血浆（EDTA抗凝优于肝素）

脑脊液（需特殊稀释处理）

细胞培养上清（离心12000×g 10分钟）

样本处理规范：

采集后2小时内离心（2000×g，15分钟，4℃）

分装储存于-80℃（避免反复冻融）

检测前室温平衡，避免震荡

脂血/溶血样本需备注（可能干扰检测）

5. 检测流程

标准操作程序：

标准曲线制备：

梯度稀释：0.5、1、5、10、20、50 ng/mL

每孔100μL，复孔检测

关键步骤参数：

孵育温度：37±1℃

孵育时间：

样本孵育：90±5分钟

酶标抗体：60±3分钟

洗涤次数：5次（浸泡30秒/次）

显色时间：严格控制在15±1分钟

质量控制：

每板需包含：

空白孔（仅稀释液）

标准曲线（R2≥0.99）

高/低值质控品

6. 技术参数

性能指标  参数要求  验证方法

检测范围  0.5-50 ng/mL  6点标准曲线

灵敏度  0.2 ng/mL  20次零标准品检测

批内精密度  CV<8%  同板20复孔

批间精密度  CV<12%  5批试剂检测

回收率  92-108%  加标回收实验

特异性  不与IGFBP-1/3/4交叉  交叉反应实验

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