人血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)elisa试剂盒

1. 基本介绍

目标分子：血管生成素样蛋白4（Angiopoietin-like Protein 4, ANGPTL4），是一种分泌型糖蛋白，属于血管生成素样蛋白家族，在脂质代谢、血管生成和炎症反应中发挥关键作用。

生物学特性：

分子量：约50-70kDa（糖基化形式）

主要来源：脂肪组织、肝脏、内皮细胞、巨噬细胞

主要功能：

抑制脂蛋白脂肪酶（LPL）活性，调节脂质代谢

参与肿瘤血管生成和转移

调控胰岛素敏感性和能量代谢

影响炎症反应和组织修复

 临床意义：

代谢性疾病标志物（肥胖、2型糖尿病）

肿瘤微环境研究（乳腺癌、结直肠癌等）

心血管疾病风险评估

脓毒症和炎症性疾病研究

检测原理

双抗体夹心ELISA法：

捕获抗体：微孔板预包被抗ANGPTL4单克隆抗体

样本孵育：样本中的ANGPTL4与固相抗体特异性结合

检测抗体：加入生物素标记的抗ANGPTL4多克隆抗体

信号放大：链霉亲和素-HRP复合物与生物素结合

显色反应：TMB底物显色，450nm测定吸光度

试剂盒组成

组分  规格  保存条件

预包被微孔板  96T（8×12可拆）  2-8℃

ANGPTL4标准品  0.5-50 ng/mL（7个梯度）  -20℃

生物素标记检测抗体  1.2mL  -20℃

链霉亲和素-HRP  1.2mL  -20℃（避光）

样本稀释液  20mL  2-8℃

TMB底物  10mL  2-8℃（避光）

终止液  10mL  室温

20×洗涤缓冲液  50mL  室温

样本要求

适用样本：

血清（推荐无抗凝管采集）

血浆（EDTA或肝素抗凝）

细胞培养上清

组织匀浆（推荐含蛋白酶抑制剂的RIPA裂解液）

样本处理：

采集后30分钟内离心（2000×g，10分钟，4℃）

分装保存于-80℃（避免反复冻融）

检测前避免反复冻融和剧烈震荡

检测流程

标准操作步骤：

标准品稀释：制备0.5、1、5、10、20、50 ng/mL梯度

加样：标准品/样本100μL/孔，37℃孵育2小时

洗涤：自动洗板机洗5次（300μL/孔）

加检测抗体：100μL/孔，37℃孵育1小时

加酶复合物：100μL/孔，37℃孵育30分钟

显色：TMB避光反应15-20分钟

终止：50μL终止液

读值：450nm主波长，630nm参比波长

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