人纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)elisa试剂盒

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一、核心信息

是用于精准检测这一关键纤溶系统调控因子的专业工具。作为纤溶酶原激活物（tPA/uPA）的主要抑制物，PAI-1在血栓形成、纤维化疾病和肿瘤转移中发挥核心调控作用。以下为基于当前最新技术标准的全面解析（北京时间2025年9月18日16:46）。

技术原理与创新特性

多形式检测系统：

活性状态识别：采用抗人PAI-1反应中心环（RCL）单抗（克隆MAI-12）作为捕获抗体，结合β-折叠A区检测抗体（克隆MAI-33），可区分活性型、潜伏型及uPA-PAI-1复合物

糖基化分析：通过凝集素（Con A）亲和层析分离不同糖基化亚型

抗干扰优化：添加重组uPA（10 ng/mL）消除复合物解离干扰（验证交叉率<0.01%）

 2025年技术升级：

新增纤溶活性抑制检测模块（基于荧光底物S-2251）

标准品溯源至WHO国际标准（NIBSC 18/236）

微孔板采用仿生纤维蛋白凝块涂层（批间差<3.2%）

试剂盒配置与关键参数

标准组件清单：

预包被96孔板（8×12可拆，充氮包装）

重组人PAI-1标准品（7梯度：0.1-100 ng/mL，含HPLC-MS鉴定证书）

检测系统：

量子点标记二抗（4℃避光稳定18个月）

电致化学发光底物（动态范围扩展25倍）

专用血浆稳定剂（含纤溶酶抑制剂cocktail）

性能指标：

参数  规格  临床意义

检测范围  0.1-100 ng/mL  覆盖生理和病理浓度

灵敏度  0.05 ng/mL  可检测早期纤溶失衡

精密度  板内CV<3%，板间CV<6%  符合ISO 15189要求

特异性  与PAI-2交叉反应<0.1%  确保检测特异性

实验操作标准化流程

样本处理规范：

血浆采集：必须使用CTAD抗凝管（抑制体外激活）

稳定性数据：

4℃保存≤24小时（需立即添加抑制剂）

-80℃可保存1年（避免反复冻融>2次）

特殊处理：

纤维化组织需液氮速冻保存

肿瘤转移灶需标注解剖位置

优化操作步骤：

离心条件：4℃ 3000×g离心15分钟（避免血小板污染）

加样策略：采用"蛇形"加样顺序减少边缘效应

关键孵育：37℃恒温振荡（650rpm）80分钟

信号检测：电化学发光读数（积分时间450ms）

临床应用与科研价值

疾病诊断临界值：

静脉血栓：血浆>50 ng/mL预示复发风险（OR=3.1）

肝纤维化：血清PAI-1/tPA比值>2.0提示F3-F4期

乳腺癌预后：组织>30 ng/mL与无转移生存期缩短相关

2025年研究前沿：

发现PAI-1通过LRP1-ERK通路调控肌成纤维细胞活化

PAI-1抑制剂（TM5441）治疗肺纤维化进入II期临床

单细胞测序揭示血栓PAI-1+血小板亚群异质性

质量控制与问题处理

质控标准：

标准曲线要求：5参数拟合R2≥0.996

必检参数：

空白信号<700 RLU

质控品回收率92-108%

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