人纤溶酶/抗纤溶酶复合体(PAP)elisa试剂盒

1. 基本介绍

目标分子：纤溶酶-抗纤溶酶复合物（Plasmin-Antiplasmin Complex, PAP）是纤溶系统活化的特异性分子标志物，由纤溶酶（Plasmin）和其主要抑制剂α?-抗纤溶酶（α?-Antiplasmin）共价结合形成。

 生物学意义：

直接反映纤溶系统激活程度

比D-二聚体更早出现，具有更高特异性

半衰期约12小时，适合监测纤溶状态变化

临床应用价值：

血栓性疾病诊断：DIC、深静脉血栓、肺栓塞

纤溶亢进监测：急性早幼粒细胞白血病（APL）、肝病

抗凝/溶栓治疗监测

创伤/术后血栓风险评估

2. 检测原理

双抗体夹心ELISA法：

捕获抗体：微孔板包被抗PAP单克隆抗体（针对纤溶酶或α?-抗纤溶酶表位）

样本反应：PAP复合物与固相抗体特异性结合

检测抗体：加入HRP标记的抗α?-抗纤溶酶抗体（或抗纤溶酶抗体）

信号放大：部分试剂盒采用生物素-链霉亲和素系统

显色测定：TMB显色，450nm测定吸光度

3. 试剂盒组成

组分  规格  保存条件

预包被微孔板  96T（8×12可拆）  2-8℃（干燥）

PAP标准品  0-50 μg/L（6-7个梯度）  -20℃

酶标抗体  HRP标记，1.5mL  -20℃（避光）

样本稀释液  20mL  2-8℃

TMB底物  10mL  2-8℃（避光）

终止液  1M H?SO?，10mL  室温

20×洗涤液  50mL  室温

4. 样本要求

适用样本：

首选：枸橼酸钠抗凝血浆（109mmol/L，1:9抗凝）

可接受：EDTA血浆、肝素血浆

不可用：血清（凝血过程消耗α?-抗纤溶酶）

样本处理：

静脉采血后立即冰浴

3000×g离心15分钟（4℃）

2小时内检测或-80℃分装保存（避免反复冻融）

5. 检测流程

标准操作步骤：

平衡：所有组分室温平衡30分钟

稀释：标准品按0、5、10、20、30、50 μg/L梯度稀释

加样：标准品/样本100μL/孔，37℃孵育90分钟

洗涤：自动洗板机洗5次（300μL/孔）

加酶标抗体：100μL/孔，37℃孵育60分钟

显色：TMB避光反应15±2分钟

终止：50μL终止液

读值：450nm主波长，630nm参比波长

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