人白介素12p40(IL-12p40)elisa试剂盒

1. 试剂盒概述

检测目标：人白细胞介素12p40（Interleukin-12 p40，IL-12p40），是IL-12和IL-23的共同亚基，参与Th1细胞免疫应答调控。

检测原理：双抗体夹心ELISA（Sandwich ELISA），特异性识别人IL-12p40单体或二聚体形式。

样本类型：血清、血浆（EDTA/肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆液等。

 2. 试剂盒组成

组分  说明

预包被微孔板  抗人IL-12p40单抗包被的96孔板

重组标准品  人IL-12p40（0-1000 pg/mL梯度）

检测抗体  生物素化抗人IL-12p40二抗

酶结合物  链霉亲和素-HRP

TMB显色液  HRP底物溶液

终止液  1M硫酸溶液

洗涤缓冲液  20×浓缩PBS-Tween

样本稀释液  含蛋白稳定剂的缓冲液

3. 检测原理

捕获：样本中IL-12p40与板载抗体结合

标记：加入生物素化检测抗体形成复合物

放大：链霉亲和素-HRP与生物素结合

显色：TMB在HRP催化下显蓝色（终止后变黄）

定量：450nm测OD值，标准曲线计算浓度

4. 主要应用

免疫学研究：Th1/Th2平衡调控机制

感染性疾病：结核、HIV等病原体免疫应答

自身免疫病：银屑病、多发性硬化症研究

肿瘤免疫：评估免疫检查点治疗疗效

5. 性能参数

参数  指标

检测范围  15.6-1000 pg/mL

最低检测限  4.7 pg/mL

板内变异系数  <8%

板间变异系数  <10%

回收率  85-115%

交叉反应  不与IL-12p70/IL-23交叉

6. 实验流程

样本准备：

血清：室温凝固30min后，1000×g离心15min

细胞上清：离心去除细胞碎片

标准品稀释：按0-1000 pg/mL梯度配制

加样孵育：100μL/孔，37℃ 2h

洗板：自动洗板机洗5次

显色检测：按说明书加入各试剂

7. 数据分析

推荐使用四参数逻辑（4PL）拟合标准曲线

典型标准曲线特征：

R2值应>0.99

ED80浓度约200pg/mL

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