人ICAM-3elisa试剂盒

                                             人ICAM-3elisa试剂盒
一、核心原理与技术特点

双抗体夹心ELISA原理：

采用高亲和力单克隆/多克隆抗体对

预包被抗人ICAM-3捕获抗体（通常识别D1结构域）

酶标记检测抗体（HRP或ALP偶联）识别不同表位

动态范围通常为15.6-1000 pg/mL，灵敏度可达3-5 pg/mL

技术优势：

可检测天然和重组人ICAM-3

与ICAM-1/ICAM-2交叉反应性<0.01%

板内变异系数<6%，板间变异系数<10%

 二、试剂盒标准配置

预包被微孔板：96孔（8×12可拆）或48孔规格

重组人ICAM-3标准品：冻干粉（0-1000 pg/mL梯度）或即用型液体

检测抗体：生物素化抗人ICAM-3抗体（100×浓缩）

信号系统：

链霉亲和素-HRP（或ALP）偶联物

TMB显色底物（避光保存）

终止液（0.5M H?SO?）

辅助试剂：

20×洗涤缓冲液（含Tween-20）

样本稀释液（含BSA稳定剂）

板封膜（防蒸发）

三、关键实验参数

参数  规格

样本类型  血清（推荐分离后-80℃保存）、EDTA/肝素血浆、细胞上清（需离心去除碎片）

样本体积  50-100μL（1:2稀释后检测）

总检测时间  3.5小时（含2小时孵育）

检测波长  450nm（校正波长540/570nm）

稳定性  未开封4℃保存6个月，开封后组分按说明书保存（酶结合物需避光）

四、操作流程优化要点

样本前处理：

避免反复冻融（≤3次）

脂血样本需10,000×g离心15分钟

含颗粒物样本需0.22μm过滤

标准曲线建立：

推荐使用4参数logistic曲线拟合

必须包含空白孔（零标准品+检测抗体）

质量控制：

每板应设置：空白对照、标准曲线、内部质控品

可接受标准：R2≥0.99，质控品回收率90-110%

五、临床应用与数据解读

生理与病理水平参考：

健康人群：血清浓度通常<200 pg/mL

炎症性疾病：类风湿关节炎患者可达500-800 pg/mL

血液系统疾病：白血病患者骨髓液可>1000 pg/mL

免疫调节研究：T细胞活化后培养上清显著升高

诊断价值：

与sICAM-1联合检测可提高慢性炎症评估特异性

动态监测有助于评估免疫治疗响应（如CAR-T治疗后3天常出现峰值）

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