人GM-CSF/CSF2elisa试剂盒

                                             人GM-CSF/CSF2elisa试剂盒
一、核心信息

双抗体夹心法：采用双抗体夹心ELISA法，预先包被抗人GM-CSF的捕获抗体的微孔板中，加入标准品和样本，温育后洗涤。随后加入生物素化的检测抗体，形成"抗体-GM-CSF-生物素抗体"复合物。加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素，与生物素结合。最后加入TMB底物显色，颜色深浅与GM-CSF浓度正相关。

检测性能

灵敏度：最低检测限为12.5 pg/mL。

检测范围：20 pg/mL～640 pg/mL。

特异性：仅检测人GM-CSF，与人EGF、Epo、FGF等无交叉反应。

精密度：板内变异系数≤10%，板间变异系数≤15%。

稳定性：样本在-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。

 适用样本及处理

样本类型：血清、血浆（EDTA或肝素抗凝）、细胞培养上清、组织匀浆等。

处理要求：

血清/血浆：室温放置或4℃过夜，1000×g离心20分钟，取上清。

细胞培养上清：1000×g离心20分钟，取上清。

组织匀浆：用预冷PBS冲洗组织，剪碎后匀浆，5000×g离心5-10分钟，取上清。

试剂盒组成

预包被酶标板：96孔或48孔，包被抗人GM-CSF捕获抗体。

标准品：不同浓度的GM-CSF标准品，用于绘制标准曲线。

检测抗体：生物素化的抗人GM-CSF检测抗体。

HRP标记链霉亲和素：用于与生物素结合。

洗涤液：用于洗涤未结合的物质。

底物液：TMB显色液。

终止液：酸性溶液，终止显色反应。

其他：封板膜、说明书等。

操作步骤

准备：平衡试剂盒至室温，稀释洗涤液。

加样：加入标准品和样本，37℃温育。

洗板：洗涤液洗涤，去除未结合物质。

加检测抗体：加入生物素化的检测抗体，温育。

洗板：再次洗涤，去除未结合的检测抗体。

加HRP标记链霉亲和素：加入HRP标记的链霉亲和素，温育。

洗板：再次洗涤，去除未结合的HRP标记链霉亲和素。

显色：加入TMB底物液，避光孵育。

终止反应：加入终止液终止显色。

测定：酶标仪在450nm波长下测定OD值。

注意事项

样本处理：避免溶血样本，正确离心和保存样本。

操作规范：严格按说明书操作，避免交叉污染。

质量控制：每次实验做标准曲线，确保结果准确。

应用领域

科研研究：用于研究GM-CSF在免疫调节、炎症反应等生理和病理过程中的作用。

疾病诊断：辅助诊断与GM-CSF异常相关的疾病，如自身免疫性疾病、感染性疾病等。

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