人G-CSF/CSF3elisa试剂盒

检测原理

双抗体夹心法：酶标板预先包被抗人G-CSF抗体，加入样本或标准品后，G-CSF与固相抗体结合。再加入生物素标记的抗G-CSF抗体，形成“抗体-G-CSF-生物素抗体”复合物。随后加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素，与生物素结合。加入底物溶液（如TMB），酶催化显色，颜色深浅与G-CSF浓度成正比。最后加入终止液，用酶标仪测定吸光度，根据标准曲线计算样本中G-CSF的浓度。

 产品组成

预包被抗人G-CSF抗体的酶标板：96孔或48孔。

G-CSF标准品：已知浓度的重组人G-CSF，用于制作标准曲线。

生物素标记的抗G-CSF抗体：用于检测样本中的G-CSF。

HRP标记的链霉亲和素：与生物素抗体结合，催化底物显色。

底物溶液：如TMB，用于显色反应。

终止液：如硫酸，用于终止显色反应。

洗涤缓冲液：用于洗涤未结合的物质。

样品稀释液：用于稀释样本和标准品。

检测步骤

准备试剂和样本：将试剂盒中的试剂平衡至室温，按说明书稀释标准品和样本。

加样：在酶标板孔中加入标准品或样本，温育以使G-CSF与固相抗体结合。

洗涤：洗去未结合的物质。

加检测抗体：加入生物素标记的抗G-CSF抗体，温育后洗涤。

加酶标记物：加入HRP标记的链霉亲和素，温育后洗涤。

显色：加入底物溶液，避光孵育，使颜色显色。

终止反应：加入终止液，终止显色反应。

测定吸光度：使用酶标仪在450 nm波长处测定各孔的吸光度值。

计算浓度：根据标准曲线，计算样本中G-CSF的浓度。

性能指标

检测范围：通常为31.2 pg/mL至2000 pg/mL。

灵敏度：最低检测限为31.2 pg/mL。

特异性：不与结构类似的其他细胞因子交叉反应。

重复性：板内变异系数≤10%，板间变异系数≤15%。

样本处理与保存

血清/血浆：采集后尽快离心，取上清液，分装后-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。

细胞培养上清：离心去除细胞碎片，立即检测或分装后-20℃保存。

组织样本：制备组织匀浆，离心取上清，按上述方法保存。

注意事项

避免污染：使用干净的移液器和枪头，防止交叉污染。

严格操作：按照说明书步骤操作，控制温育时间和温度。

试剂保存：未开封试剂盒储存在2-8℃，避免反复冻融。

结果解读：结合临床和其他检测结果综合判断。

应用领域

科研研究：研究G-CSF在造血、免疫调节、炎症反应等生理和病理过程中的作用。

临床诊断：辅助诊断中性粒细胞减少症、感染、炎症性疾病等。

药物开发：评估药物对G-CSF表达的影响。

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