人Agouti相关蛋白(AgRP)elisa试剂盒

AgRP是一种由下丘脑弓状核神经元产生的神经肽，主要功能是增加食欲并减少能量消耗，是目前已知的最强的食欲刺激剂之一。

检测原理

试剂盒采用双抗体夹心法，利用纯化的抗体包被微孔板，依次加入待测样本和HRP标记的抗体，形成免疫复合物。加入底物TMB后显色，颜色深浅与AgRP浓度呈正相关，通过酶标仪测定吸光度，绘制标准曲线计算浓度。

 试剂盒组成

微孔酶标板：预包被抗体的96孔或48孔板。

标准品：已知浓度的AgRP标准品。

检测抗体-HRP：辣根过氧化物酶标记的抗体。

洗涤缓冲液：用于洗涤未结合的物质。

底物A和B：TMB显色液。

终止液：酸性溶液，终止显色反应。

其他：封板膜、样品稀释液等。

适用样本

血清：室温凝固后离心收集。

血浆：使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝，离心后取上清。

细胞培养上清：离心去除颗粒。

组织匀浆：组织捣碎后离心取上清。

检测性能

灵敏度：可检测低至18.75 pg/mL的AgRP。

特异性：与结构类似物无交叉反应。

重复性：板内和板间变异系数均小于10%。

回收率：在85%-115%之间。

操作步骤

样本处理：按要求收集、处理和保存样本。

加样：将标准品和样本加入微孔板，温育结合抗体。

洗涤：去除未结合的物质。

显色：加入底物液，避光显色。

终止：加入终止液，终止反应。

测定：酶标仪测定吸光度，计算AgRP浓度。

注意事项

样本保存：避免反复冻融，分装后-20℃保存。

试剂保存：2-8℃保存，避免冻结。

操作规范：严格按说明书操作，避免污染。

应用领域

该试剂盒广泛应用于基础研究、药物开发和临床前研究，帮助理解AgRP在能量代谢和食欲调节中的作用机制。

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