大鼠胃蛋白酶原I(PGI)elisa试剂盒

                                             大鼠胃蛋白酶原I(PGI)elisa试剂盒
一、核心检测信息

1. 检测原理

采用双抗体夹心ELISA技术，特异性识别大鼠PGI的酶原形式（42kDa）。预包被抗大鼠PGI单抗（克隆号：RPGI-02）捕获样本中的PGI，生物素标记的二抗通过链霉亲和素-HRP系统催化TMB显色，450nm吸光度值与PGI浓度正相关。

2. 核心组分

组分  规格  保存条件  关键特性

预包被板  96T  2-8℃（含干燥剂）  抗PGI特异性单抗（Kd=0.2nM）

重组标准品  0-200ng/mL  -80℃  纯化大鼠胃黏膜提取物（NIBSC标准）

胃酸中和液  10mL  4℃  pH7.4磷酸盐缓冲液

血清稳定剂  5mL  -20℃  含蛋白酶抑制剂

胃蛋白酶抑制剂  1mL  -20℃  1mM Pepstatin A

性能参数

检测范围：1.56-100ng/mL（可扩展至500ng/mL）

灵敏度：0.5ng/mL（基于3SD空白值）

样本兼容性：

最佳：胃黏膜组织匀浆（1:10稀释）

适用：血清（需1:5稀释）、胃液（需中和处理）

交叉反应：

大鼠PGI：100%

PGII：<0.1%

人PGI：<0.01%

精密度：

批内CV：5.2-7.8%

批间CV：8.5-10.9%

样本处理规范

4.1 胃黏膜采集

解剖取胃体部黏膜（避开溃疡区域）

按1:9（w/v）加入冷PBS

超声破碎（冰浴，20kHz，3×5秒）

4℃ 12000×g离心20分钟

4.2 胃液处理

采集后立即加入等体积中和液

离心（3000×g，10分钟）去除沉淀

加入Pepstatin A（终浓度1μM）

4.3 血清采集

空腹12小时后采血（避免进食刺激）

使用促凝管，室温凝固30分钟后离心

-80℃分装保存（≤3次冻融）

实验操作要点

标准曲线制备

梯度稀释：0、1.56、3.12、6.25、12.5、25、50、100ng/mL

复溶液：含0.1% BSA的PBS（pH7.4）

关键步骤控制

孵育条件：37℃恒温振荡（150rpm）

洗板程序：自动洗板机（300μL/孔×5次）

显色终止：1M HCl（50μL/孔）

质控标准

空白OD值：≤0.08

最低检测限：≥1.5ng/mL

胃黏膜阳性对照：≥50ng/mL

主要应用方向

胃黏膜损伤：NSAIDs药物毒性评估

胃癌研究：癌前病变监测

消化性溃疡：幽门螺杆菌感染模型

胃功能评估：胃酸分泌相关研究

7. 注意事项

实验设计

推荐同步检测胃泌素（Gastrin-17）

必须设置：正常饮食对照组

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