大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)elisa试剂盒

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一、核心检测信息

检测靶标：大鼠成熟BDNF（14kDa活性形式）

检测原理：夹心ELISA（特异性识别proBDNF剪切位点）

动态范围：20-5000 pg/mL（5.5个数量级）

灵敏度：<5 pg/mL（可检测单个神经元分泌量）

样本兼容性：

脑脊液（需超滤浓缩10倍）

海马/皮层组织匀浆

血清/血浆（肝素抗凝）

神经元条件培养基

关键技术突破

抗体对设计：

捕获抗体：抗成熟结构域（Clone 3F8）

检测抗体：抗pro结构域（HRP标记）

特异性控制：

不识别proBDNF（32kDa）

与NT-3/NT-4交叉反应<0.01%

实验方案优化

脑组织处理：

matlab

快速取材：断头后2min内取出海马

匀浆缓冲液=含1%蛋白酶抑制剂的RIPA

离心条件=15000×g,30min,4℃

神经元培养：

高钾刺激：50mM KCl,5min

上清收集：刺激后24h

标准曲线配置：

7点梯度（5000-20 pg/mL）

推荐四参数logistic回归

质量控制系统

参数  验收标准

批内CV  ≤6%

批间CV  ≤10%

回收率  92-108%

-80℃稳定性  24个月

核心应用领域

神经退行性疾病：

阿尔茨海默病模型

帕金森病神经保护研究

精神疾病：

抑郁症模型评估

应激障碍机制研究

神经再生：

脊髓损伤修复监测

脑卒中后神经发生

关键操作规范

特殊处理要求：

全程使用硅化EP管（防蛋白吸附）

避免反复冻融（≤2次）

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