大鼠巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP-3α)elisa试剂盒

                                             大鼠巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP-3α)elisa试剂盒
一、核心检测信息

检测目标

特异性定量大鼠血清、肠道组织匀浆、关节滑液或呼吸道灌洗液中的 MIP-3α（CCL20），一种由巨噬细胞和上皮细胞分泌的CC趋化因子，通过结合CCR6受体招募Th17细胞、树突细胞，参与黏膜免疫防御、自身免疫疾病及肿瘤微环境调控。

检测原理

双抗体夹心ELISA：

预包被抗大鼠MIP-3α单抗（靶向N端表位）捕获目标蛋白 → 生物素标记二抗（识别40-70aa片段）结合 → 高敏HRP-TMB显色系统（450nm/570nm双波长校正）。

可选功能验证模块：通过CCR6+细胞迁移实验验证检测到的MIP-3α生物活性。

 二、技术参数与验证

关键指标  技术说明

检测范围  15.6-1000 pg/mL（7梯度点）

最低检测限  4.7 pg/mL（可检测低水平炎症）

样本兼容性  血清（EDTA抗凝）、结肠黏膜裂解液（含蛋白酶抑制剂）、滑膜液（需透明质酸酶处理）

特异性验证  不与大鼠MIP-1α、MIP-3β交叉

稳定性测试  反复冻融3次回收率＞92%

三、典型应用场景

肠道炎症研究

溃疡性结肠炎模型中MIP-3α/CCR6轴对IL-17A分泌的促进作用

类风湿关节炎

关节滑液中MIP-3α水平与疾病活动指数（DAS28）的相关性

肿瘤免疫治疗

黑色素瘤微环境中MIP-3α对Treg细胞浸润的调控机制

检测

四、操作关键要点

样本处理

肠道样本：需分离固有层单核细胞（LPMCs）并裂解检测

血清样本：采集后30分钟内离心（2000×g, 10min），-80℃分装

实验优化

高浓度样本需1:5稀释（使用含0.5% BSA的PBS）

每板设置LPS刺激阳性对照（10μg/mL处理巨噬细胞上清）

五、质控要求：

每板需包含：空白孔、跨板质控品（CV＜10%）、物种特异性验证孔

注意事项

干扰因素

高浓度肝素（＞5 IU/mL）会抑制MIP-3α与CCR6结合

数据解读

建议联合检测IL-23和IL-1β以评估Th17极化微环境

保存规范

未开封试剂盒4℃避光保存（有效期12个月），标准品-80℃分装（冻融≤2次）

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