小鼠赖氨酰氧化酶(LOX)ELISA试剂盒

产品概述

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），用于定量检测小鼠血清、血浆、组织匀浆等样本中赖氨酰氧化酶（LOX）的含量。试剂盒包含预包被抗体的微孔板、酶标抗体、标准品、显色底物及洗涤缓冲液等组分，具有高灵敏度、高特异性和稳定性，适用于科研实验，不可用于临床诊断。

检测原理

固相包被：微孔板预包被小鼠LOX特异性抗体。

抗原结合：样本中的LOX与固相抗体结合，洗涤后加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

显色反应：加入底物TMB，在HRP催化下产生蓝色产物，终止反应后转为黄色，450 nm波长下测定吸光度（OD值），其强度与LOX浓度呈正相关。

试剂盒组成

预包被微孔板：96孔（或48孔）

标准品：浓度梯度LOX冻干粉（需复溶）

酶标抗体：HRP标记的抗LOX抗体

显色底物：TMB溶液

终止液：2M硫酸溶液

洗涤缓冲液：20×浓缩液（需稀释）

封板膜：用于孵育时密封微孔板

自备器材

仪器：

酶标仪（450 nm主波长，570 nm/630 nm校正波长）

洗板机（每孔加液量≥0.35 mL）

离心机、涡旋振荡器

耗材：

精密移液器（0.5-1000 μL范围）及无菌吸头

蒸馏水或去离子水

操作步骤

标准品稀释：用样本稀释液复溶标准品，制备系列浓度梯度。

加样：每孔加入样本或标准品100 μL，37℃孵育60分钟。

洗涤：弃去液体，每孔加洗涤液300 μL，重复5次。

加酶标抗体：每孔加入HRP标记抗体100 μL，37℃孵育30分钟。

显色与终止：洗涤后加入TMB底物100 μL，避光反应15分钟，加终止液50 μL。

检测：450 nm处读取OD值，绘制标准曲线并计算样本浓度。

注意事项

样本处理：避免反复冻融，离心去除颗粒物。

试剂保存：未开封组分2-8℃保存，复溶后标准品需分装冻存（-20℃）。

安全性：终止液含强酸，操作时需佩戴防护用具。

性能参数

检测范围：15.6-1000 pg/mL

灵敏度：<5 pg/mL

批内变异系数（CV）：<10%

批间变异系数（CV）：<15%

有效期

未开封试剂盒有效期为6个月，具体日期见外包装标签。

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