小鼠软骨寡聚基质蛋白(COMP)ELISA试剂盒

检测原理

本试剂盒采用双抗体夹心ABC-ELISA法。通过抗小鼠COMP单克隆抗体预包被酶标板，样本中的COMP与固相抗体结合后，加入生物素化抗小鼠COMP抗体形成复合物，再结合辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素。加入底物显色后，在450 nm波长下测定吸光度（OD值），COMP浓度与OD值呈正相关，通过标准曲线计算样本中COMP含量。

适用范围

适用于血清、血浆、细胞培养上清液及其他生物体液中COMP的定量检测。

试剂盒组成（2-8℃保存）

预包被酶标板（96孔）

酶标抗体工作液（12 mL）

10×标本稀释液（12 mL）

20×浓缩洗涤液（需稀释使用）

标准品（浓度梯度需用户按说明书稀释）

底物工作液（显色用）

终止液

操作步骤要点

样本处理：

血清/血浆需离心去除颗粒物；细胞上清液需去除沉淀。

高浓度样本需用稀释液预稀释（如30倍稀释）。

加样与孵育：

标准品与样本加入对应孔位，避免交叉污染（建议更换枪头）。

37℃孵育后彻底洗涤（推荐使用洗板机，减少人为误差）。

显色与终止：

加入底物工作液避光显色，显色时间需严格控制。

终止液加入后30分钟内测定OD值。

注意事项

洗涤关键性：洗涤不彻底可能导致非特异性吸附，影响检测灵敏度。

样本保存：反复冻融会降解COMP，建议分装保存于-80℃。

质量控制：建议每批次实验加入质控血清以监控准确性。

包被原稳定性：重组蛋白需冰浴缓慢解冻，避免降解。

技术参数

检测范围：通常为15.6-1000 pg/mL（具体以标准曲线为准）。

灵敏度：<5 pg/mL。

批内/批间差异：CV<10%。

储存与有效期

未开封试剂盒保存于2-8℃，有效期12个月。

开封后酶标板需密封防潮，其余组分按标签要求保存。

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