小鼠细胞外基质蛋白1(ECM1)ELISA试剂盒

产品概述

本试剂盒用于体外定量检测小鼠血清、血浆、细胞培养上清液或组织样本中的天然或重组ECM1蛋白浓度。采用双抗体夹心ELISA原理，具有高灵敏度、高特异性和稳定性，适用于科研实验。

试剂盒组分

预包被微孔板：96孔或48孔（视规格而定），包被抗小鼠ECM1抗体。

标准品：重组小鼠ECM1蛋白（浓度梯度）。

检测抗体：HRP标记的抗小鼠ECM1抗体。

底物溶液（A/B）：TMB或其他显色底物。

终止液：硫酸溶液（2M）。

洗涤缓冲液（浓缩液，需稀释）。

封闭液：无关蛋白（如BSA）溶液。

实验步骤

样本准备

血清/血浆：采集后离心去除杂质，-20℃保存。

组织样本：匀浆后离心取上清液。

细胞上清液：直接收集或离心去除碎片。

标准品稀释

按说明书梯度稀释标准品（如0、31.25、62.5、125、250、500、1000 pg/mL）。

加样与孵育

每孔加入50-100μL标准品或样本，37℃孵育1-2小时。

洗涤5次（手动或洗板机），每次350μL洗涤液，拍干。

检测抗体孵育

每孔加入HRP标记抗体50μL，37℃孵育1小时，再次洗涤。

显色与终止

每孔加入底物A/B各50μL，避光孵育15分钟。

加入50μL终止液，反应液变黄色。

读数

15分钟内于450nm波长测定OD值（参考波长630nm校正）。

数据分析

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线。

通过曲线方程计算样本中ECM1浓度。

注意事项

样本要求：避免反复冻融，溶血或脂血样本需预处理。

实验条件：室温平衡试剂，避免底物接触金属离子。

安全操作：终止液为强酸，需佩戴防护装备。

适用范围：仅限科研，不用于临床诊断。

技术参数

检测范围：15.6-1000 pg/mL（具体以实际标准曲线为准）。

灵敏度：<10 pg/mL。

批内/批间差：CV<10%。

储存条件：2-8℃保存，避免冷冻。

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