小鼠组织因子(TF)ELISA试剂盒

预期用途

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），定量检测小鼠血清、血浆或其他生物液体中的组织因子（TF）含量，适用于科研用途，不用于临床诊断。

实验原理

包被：抗小鼠TF抗体预包被于酶标板孔内。

结合：样本中的TF与包被抗体结合，再依次加入生物素化检测抗体、辣根过氧化物酶（HRP）标记的亲和素，形成复合物。

显色：加入TMB底物后，在HRP催化下产生蓝色产物，终止液转化为黄色，颜色深度与TF浓度成正比。

检测：450 nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算浓度。

试剂盒组成

| 组分 | 规格/数量 | 备注 |

| 预包被酶标板 | 96孔 | 可拆卸，12孔×8条 |

| TF标准品 | 冻干粉×2瓶 | 临用前用样本稀释液复溶至4,000 pg/mL，梯度稀释至15.6 pg/mL |

| 生物素化检测抗体 | 1瓶（6 mL） | 需避光保存 |

| HRP标记亲和素 | 1瓶（6 mL） | |

| 显色剂（TMB A/B液） | 各6 mL | 使用前15分钟平衡至室温 |

| 20×浓缩洗涤液 | 25 mL | 稀释为1×工作液（蒸馏水定容） |

| 终止液 | 6 mL | 2M硫酸溶液 |

操作步骤

试剂准备：

标准品复溶：用1 mL样本稀释液溶解冻干粉，静置10分钟混匀，随后梯度稀释（1,000→15.6 pg/mL）。

洗涤液配制：20×浓缩液按1:19比例稀释。

加样与孵育：

标准品孔：加入50 μL各浓度标准品。

样本孔：10 μL样本+40 μL稀释液（1:5稀释）。

37℃孵育60分钟，洗板5次。

检测：

依次加入生物素化抗体、酶结合物，每次孵育30分钟后洗涤。

加入TMB显色15分钟，终止后30分钟内测定OD450值。

注意事项

样本处理：避免反复冻融，溶血或高脂样本需离心后检测。

标准曲线：建议复孔检测，R²≥0.99方有效。

灵敏度：检测下限为15.6 pg/mL，线性范围31.25–2,000 pg/mL。

储存条件

未开封试剂盒2–8℃保存，复溶后标准品分装-20℃冻存，避免反复冻融。

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