小鼠C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒

检测目的

用于定量测定小鼠血清、血浆或其他生物液体样本中C反应蛋白（CRP）的浓度，适用于炎症反应、感染或心血管疾病等研究领域。

实验原理

采用双抗体夹心法：

包被抗体：微孔板预包被抗小鼠CRP单克隆抗体。

抗原结合：样本中的CRP与固相抗体结合，形成抗原-抗体复合物。

酶标抗体：加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的二抗，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

显色反应：加入底物TMB后，在HRP催化下显蓝色，酸性终止液转化为黄色，颜色深度与CRP浓度正相关。

检测：450 nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样本浓度。

试剂盒组成

预包被微孔板：96孔或48孔配置（根据规格选择）

标准品：CRP浓度梯度标准液（需按说明书稀释）

酶标抗体：HRP标记的抗小鼠CRP抗体

洗涤缓冲液：20×浓缩液（使用前稀释）

显色底物（TMB）：避光保存

终止液：酸性溶液（如3M HCl）

封板膜：防止蒸发污染

样本要求

类型：血清、血浆（EDTA/肝素抗凝）、细胞培养上清等。

处理：避免反复冻融，离心去除颗粒物，-20℃保存（长期需-80℃）。

检测范围

典型检测限为80–2400 μg/L（具体以实际标准曲线为准）。

操作步骤

标准品稀释：按说明书制备系列浓度。

加样：每孔加入样本或标准品，室温孵育1–2小时。

洗涤：弃液后使用洗涤液清洗3–5次。

加酶标抗体：孵育30–60分钟，再次洗涤。

显色：加入TMB避光反应15分钟，终止后30分钟内检测。

注意事项

不同批次试剂不可混用。

终止液具腐蚀性，需谨慎操作。

显色时间过长可能导致假阳性，需严格控制反应时间。

数据计算

以标准品OD值绘制曲线（建议四参数拟合），样本浓度通过曲线方程计算。

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