人激肽释放酶3(PSA)ELISA试剂盒 新品

商品属性

预期用途

本试剂盒采用酶联免疫吸附试验（ELISA）原理，定量检测人血清、血浆、细胞培养上清或组织匀浆中的人激肽释放酶3(PSA，适用于临床诊断或科研分析。

检测原理

双抗体夹心法：

微孔板预包被抗PSA捕获抗体，加入待测样本后，PSA与固相抗体结合。

依次加入生物素化检测抗体、HRP标记的链霉亲和素，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

经TMB底物显色，颜色深度与PSA浓度呈正相关，450nm波长下测定吸光度（OD值）计算浓度。

间接法（可选）：

适用于未知抗体检测，步骤包括抗原包被、待测抗体孵育、酶标二抗结合及显色。

操作步骤

样本制备：

血清/血浆：3000rpm离心10-30分钟（血浆需抗凝处理）。

细胞上清/组织匀浆：离心去除颗粒物，取上清检测。

检测流程：

加样：每孔加入100μl样本或标准品（需梯度稀释），37℃孵育1小时，洗涤。

加酶标抗体：加入HRP标记抗体100μl，37℃孵育30-60分钟，洗涤。

显色：加入TMB底物100μl，避光反应10-30分钟，显蓝色。

终止：加入50μl终止液（2M硫酸），溶液变黄色。

读数：450nm处测定OD值（空白孔调零），标准曲线计算浓度。

结果判读

定性：肉眼观察，阳性孔呈黄色（颜色越深浓度越高），阴性为无色或浅色。

定量：样本OD值＞阴性对照2.1倍视为阳性，标准曲线拟合浓度。

注意事项

试剂盒需2-8℃保存，复溶后标准品需15分钟内使用。

避免反复冻融样本，操作时需佩戴防护用具。

不同批次试剂不可混用，洗涤需彻底以减少背景干扰。

局限性

仅限体外诊断，结果需结合临床其他指标综合评估。

高浓度样本需稀释后复测，避免钩状效应。

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