人肾上腺素能受体α1A(ADRa1A)ELISA试剂盒 新品

商品属性

检测原理

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。将抗ADRa1A抗体预包被于酶标板，样本或标准品中的ADRa1A与固相抗体结合后，依次加入生物素化检测抗体、链霉亲和素-HRP复合物（SABC）及TMB显色底物。显色反应终止后，通过450 nm波长测定吸光度（OD值），ADRa1A浓度与OD值呈正相关，标准曲线计算样本浓度。

试剂盒组分（48T/96T规格）

| 组分名称 | 48T规格 | 96T规格 | 保存条件 |

| 预包被酶标板 | 8×6条 | 8×12条 | 4℃ |

| ADRa1A标准品 | 1支（冻干粉） | 1支（冻干粉） | -20℃ |

| 标准品/样本稀释液 | 10 mL | 15 mL | 4℃ |

| 生物素化检测抗体（100×）| 60 μL | 120 μL | -20℃ |

| 生物素化抗体稀释液 | 6 mL | 12 mL | 4℃ |

| SABC复合物 | 6 mL | 12 mL | 4℃ |

| TMB显色液（A/B） | 各3 mL | 各6 mL | 4℃（避光）|

| 终止液 | 6 mL | 12 mL | 4℃ |

| 20×浓缩洗涤液 | 30 mL | 60 mL | 4℃ |

| 封板胶纸 | 2张 | 4张 | 室温 |

| 说明书 | 1份 | 1份 | — |

操作步骤

标准品配制：冻干标准品用稀释液复溶至1 mL（1,600 pg/mL），梯度稀释为400、200、100、50、25、12.5、6.25 pg/mL系列浓度。

加样：每孔加入100 μL标准品或样本，37℃孵育90分钟。

洗涤：弃液后以1×洗涤液洗板5次。

加检测抗体：每孔加入生物素化抗体（1:100稀释）100 μL，37℃孵育60分钟。

加SABC：洗涤后每孔加入SABC 100 μL，37℃避光孵育30分钟。

显色：加入TMB A/B液各50 μL，避光反应15-30分钟（显蓝色）。

终止与检测：加入终止液50 μL，450 nm读取OD值。

注意事项

样本处理：避免反复冻融，新鲜样本需离心去除沉淀；分装保存于-80℃。

实验控制：标准品与样本建议双复孔检测，取平均值减少误差。

显色调节：若显色过浅，可延长TMB孵育时间（不超过30分钟）。

酶标板保存：未用完板条需密封干燥保存，避免受潮。

干扰因素：溶血、脂血或细菌污染样本可能导致假阳性，需预处理。

技术参数

检测范围：6.25–400 pg/mL（48T/96T通用）。

灵敏度：<5 pg/mL。

批内/批间差：CV<10%和<15%。

特异性：不与ADRa1B、ADRa1D等亚型交叉反应。

常见问题

标准曲线异常：检查稀释步骤是否准确，避免板内直接倍比稀释。

高背景值：确保洗涤充分，各步骤孵育时间严格把控。

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