人阴离子/糖转运蛋白(AST)ELISA试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒用于体外定量检测人血清、血浆或其他生物样本中阴离子/糖转运蛋白（AST）的浓度。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），具有高灵敏度和特异性，适用于科研及临床研究。

试剂盒组成

预包被微孔板：96孔或48孔（根据规格选择），包被抗AST抗体。

标准品：系列浓度AST标准溶液（冻干或液体）。

检测抗体：生物素标记的抗AST抗体。

酶结合物：辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素。

显色底物：TMB（四甲基联苯胺）。

终止液：2M硫酸溶液。

洗涤缓冲液：20×浓缩液，需稀释使用。

样本稀释液：用于样本预处理。

检测原理

采用双抗体夹心法：样本中的AST与预包被抗体结合，再与生物素标记的检测抗体及HRP酶结合物反应，通过TMB显色。显色强度与AST浓度成正比，通过酶标仪测定吸光度（450nm）并计算浓度。

样本要求

血清/血浆：采集后离心去除颗粒物，-20℃保存避免反复冻融。

细胞培养上清：离心去除沉淀，立即检测或分装冻存。

其他体液：需验证样本兼容性。

操作步骤

标准品稀释：按说明书梯度稀释。

加样：标准品及样本加入微孔板，37℃孵育1-2小时。

洗涤：弃液体，洗涤缓冲液洗板3次。

加检测抗体：37℃孵育1小时。

加酶结合物：37℃避光反应30分钟。

显色：加入TMB底物，避光反应15-30分钟。

终止：加入终止液，酶标仪读取OD450nm。

结果计算

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，通过曲线方程计算样本浓度。

注意事项

试剂盒需在2-8℃保存，避免反复冻融标准品或酶结合物。

不同批次试剂不可混用。

显色时间需严格控制，避免过度反应。

实验废弃物需按生物危害规范处理。

性能参数

检测范围：通常为0.1-100 ng/mL。

灵敏度：≤0.05 ng/mL。

批内/批间差异：CV＜10%。

常见问题

反应时间差异：由抗体亲和力及实验设计决定，高亲和力抗体可缩短孵育时间。

抗体稳定性：稀释后需分装保存于-20℃，避免反复冻融。

批间差异控制：建议使用同一批次试剂，并严格标准化操作流程。

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