人白介素18(IL-18)ELISA试剂盒

预期应用

检测目标：定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其他生物液体中的IL-23含量。

检测范围：15.6–1,000 pg/mL（通过系列倍比稀释标准品实现）。

实验原理

采用双抗体夹心法：

包被抗体：纯化的抗IL-18抗体包被微孔板；

样本/标准品加入：与固相抗体结合；

生物素化抗体与HRP亲和素：依次加入生物素化抗IL-18抗体、HRP标记亲和素，形成复合物；

显色反应：底物TMB在过氧化物酶催化下显蓝色，加酸终止后转为黄色；

定量检测：在450nm波长测定OD值，浓度与颜色深度正相关。

试剂盒组成

| 组分 | 规格/数量 | 配制要求 |

| 酶联板 | 96孔板（1块） | 直接使用 |

| 标准品（冻干品） | 2瓶（1,000 pg/mL） | 临用前用样品稀释液稀释至1mL，静置10分钟，混匀溶解 |

| 样品稀释液 | 1×20mL | 直接使用 |

| 检测溶液A/B | 各1×120μL | 临用前按1:100比例分别用检测稀释液A/B稀释 |

| 底物溶液 | 1×10mL | 直接使用 |

| 浓洗涤液 | 1×30mL | 用蒸馏水稀释25倍（即1mL浓液+24mL水） |

| 终止液（2N H₂SO₄）| 1×10mL | 直接使用 |

| 覆膜 | 5张 | 直接使用 |

操作流程概要

标准品配制：用样品稀释液将标准品梯度稀释至目标浓度（1,000、500、250、125、62.5、31.2、15.6 pg/mL），0 pg/mL为纯稀释液。

加样与孵育：

每孔依次加入样本/标准品、生物素化抗体、HRP亲和素（具体用量参照说明书）；

各步骤间使用稀释后的洗涤液充分洗涤。

显色与终止：

每孔加TMB底物溶液，避光反应；

加终止液后15分钟内测定OD值。

结果计算：

以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线；

根据样本OD值在曲线上推算IL-23浓度。

注意事项

仅供体外研究使用。

自备设备：酶标仪（预热至稳定）、微量加液器、吸头、EP管、蒸馏水。

试剂稳定性：检测溶液A/B需在使用前1小时内配制。

样本处理：避免反复冻融，血浆样本需使用EDTA或肝素抗凝。

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