人白介素31(IL-31)ELISA试剂盒

产品简介

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的 IL-5 浓度。灵敏度高、特异性强，适用于科研和临床研究。

检测原理

包被抗体：微孔板预包被抗人IL-5单克隆抗体。

样本结合：样本中的IL-5与包被抗体结合。

检测抗体：加入生物素标记的检测抗体，形成“抗体-抗原-抗体”复合物。

显色反应：加入HRP标记的链霉亲和素和TMB底物，显色强度与IL-5浓度成正比。

试剂盒组成

| 组分 | 96T规格 | 保存条件 |

| 预包被微孔板 | 1块（12×8孔） | 2-8℃（干燥） |

| 标准品（重组人IL-5）| 6管（0-500 pg/mL） | -20℃（避免反复冻融） |

| 生物素标记检测抗体 | 1瓶（120 μL） | 2-8℃ |

| HRP-链霉亲和素 | 1瓶（120 μL） | 2-8℃（避光） |

| TMB显色液 | 1瓶（10 mL） | 2-8℃（避光） |

| 终止液（2M H₂SO₄） | 1瓶（10 mL） | 室温 |

| 洗涤缓冲液（20×） | 1瓶（50 mL） | 2-8℃（稀释后4℃保存） |

样本要求

血清/血浆：采集后离心去除颗粒，-20℃保存，避免反复冻融。

细胞上清：离心去除沉淀，立即检测或-80℃保存。

稀释建议：高浓度样本需用标准品稀释液预稀释。

操作步骤

标准品稀释：按0、15.6、31.2、62.5、125、250、500 pg/mL梯度稀释。

加样：每孔加100 μL标准品或样本，37℃孵育2小时。

洗涤：弃液后，用1×洗涤缓冲液洗3次。

加检测抗体：每孔加100 μL生物素标记抗体，37℃孵育1小时。

加酶结合物：每孔加100 μL HRP-链霉亲和素，37℃避光孵育30分钟。

显色：加90 μL TMB，37℃避光显色15分钟。

终止：加50 μL终止液，450 nm波长测OD值。

结果计算

以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，绘制标准曲线。

根据样本OD值，从曲线方程计算IL-5浓度。

性能参数

灵敏度：≤5 pg/mL

检测范围：15.6-500 pg/mL

批内变异系数（CV）：<8%

批间变异系数（CV）：<10%

特异性：不与IL-4、IL-13等交叉反应。

注意事项

试剂使用前平衡至室温，避免反复冻融标准品。

不同批次试剂不可混用。

终止液为强酸，避免接触皮肤。

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