人存活素(Surv)ELISA试剂盒

试剂盒基本信息

检测原理
双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。

检测样本：人血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清等生物液体。

产品规格：96孔/48孔板。

检测范围：31.2-2000 pg/mL。

灵敏度：12.5 pg/mL。

有效期：6个月（2-8℃避光保存）。

试剂盒组分（以96T为例）

| 组分 | 规格 | 保存条件 |

| 预包被酶标板 | 8×12孔 | 4°C |

| 标准品 | 2 vial | 4°C |

| 标准品稀释液 | 10 mL | 4°C |

| 样品稀释液 | 10 mL | 4°C |

| 酶标检测抗体 | 120 μL | 4°C |

| TMB显色液（A/B组份）| 各5 mL | 4°C（避光） |

| 显色终止液 | 10 mL | 4°C |

| 浓缩洗液（25×） | 30 mL | 4°C |

注：使用前需将浓缩洗液用蒸馏水稀释至1×工作液。

样本处理关键步骤

血清：

全血室温静置2小时或4℃过夜→1000g离心20分钟→取上清。

避免反复冻融（-20℃/-80℃保存）。

血浆：

EDTA/肝素抗凝→采集后30分钟内1000g离心（2-8℃）→取上清。

细胞上清/组织匀浆：

1000g离心20分钟→取澄清上清液检测。

严禁使用溶血或高脂样本（影响检测准确性）。

操作流程

加样：

每孔加入标准品/样本100 μL→37℃孵育90分钟→洗板4次。

注意：样本分离困难时，室温静置1-2小时后再离心。

加酶标抗体：

每孔加HRP标记检测抗体100 μL→37℃孵育60分钟→洗板4次。

洗板提示：手动洗板需彻底，避免孔间交叉污染。

显色：

加TMB显色液A/B组份各50 μL→37℃避光反应15分钟。

注意：现配现用，过期显色剂或放置过久导致结果异常。

终止与读数：

加终止液50 μL→酶标仪450nm波长读取OD值→计算浓度（标准曲线法）。

所需自备器材

酶标仪（450nm）

精密移液器及枪头（0.5-1000μL范围）

37℃恒温箱

蒸馏水及洗板机/手动洗板装置

注意事项

试剂解冻：使用前30分钟将试剂平衡至室温。

重复冻融：样本及标准品避免>2次冻融，分装保存。

显色控制：TMB变蓝后及时终止，防止过度反应。

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